实验五血涂片制备染色及白细胞形态精要.pptVIP

实验五、血涂片制备染色及白细胞形态观察 付毓平 临床检验诊断学教研室 根据不同的细胞种类及细胞的不同成分，对酸性及碱性染料的结合能力不同，而使各种细胞呈现出各自的特点。 掌握血涂片的制备和染色方法及白细胞的正常形态。 原理 目的 器材 载玻片、推片、洗耳球、显微镜、微量吸管、拭镜纸 试剂 瑞氏染液、磷酸缓冲液、香柏油、乙醇-乙醚溶液、 标本 EDTA抗凝静脉血 血 涂 片制 备 推片 载玻片 血液 将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度：快、大(厚)。慢、小（薄） 一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明 涂片干燥后用铅笔在血涂片的头 部写上姓名和编号 李四 B 1 2 3 1.玻片清洗：新玻片常有游离碱质,因此应用清洗液或10%盐酸浸泡24h,然后再彻底清洗。用过的玻片可放入适量肥皂水煮沸20min,再用热水将肥皂和血膜洗去,自来水反复冲洗,必要时再置95%乙醇中浸泡1h,然后擦干或烤干备用。 2.使用玻片：只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面,以保持玻片清洁、干燥、中性、无油腻。 3.良好的血涂片,厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐, 两侧留有空隙。 血滴越大，角度越大，速度越大，血膜越厚。 注意事项 血 涂 片 染色 滴加瑞氏染色Ⅱ液3-5滴，用洗耳球将Ⅰ液和Ⅱ液轻轻吹混，静置10分钟 直接流水冲洗3-5分钟 （切勿先倒掉染液） 干燥后用油镜观察白细胞形态 李四123 涂片干燥后加瑞氏染色Ⅰ液3-5滴至覆盖整个血膜，约1分钟 血涂片的观察 低倍镜观察 1.染色情况(满意、偏酸or偏碱） 2. 细胞分布情况 油镜下观察各细胞形态（体尾交界处） 李四123 外周血白细胞正常形态 粒细胞 淋巴细胞 单核细胞 外周血正常白细胞形态 正常白细胞形态 中性杆状核粒细胞 中性分叶核粒细胞 正常白细胞形态 嗜酸性粒细胞 正常白细胞形态 嗜碱性粒细胞 正常白细胞形态 单核细胞 正常白细胞形态 淋巴细胞 正常白细胞形态 注意事项 1.血涂片干透后方可染色，否则染色过程中容易脱落。 2.加染液应适量，过少易蒸发形成沉渣，不易观查。 3.冲洗时不能倾倒掉染液，应先以流水冲洗，以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不宜过久，以防脱色。 4.分类时要沿一定方向连续进行，避免主观选择视野。 5.镜下见到幼红细胞，应计数但不计入100个白细胞 6.注意其他细胞形态。 1.请绘制5种白细胞形态。 分析讨论