calpain化对跨膜ampa受体调节蛋白的影响及其作用机制研究.pdf

中文摘要 第一部分体外calpain原位活化对大鼠脑组织stargazin／TRP—Y8的影响 目的：在中枢神经系统，AMPA受体介导快速兴奋性突触传导，突触膜上AMPA受体的 数量和功能直接影响突触传导的效能。TARPs作为跨膜AMPA受体调节蛋白家族，在 AMPA受体由细胞内向细胞外转运、突触膜定位及调节受体功能方面起着重要的作用。 体在突触后致密区的表达。本部分实验旨在通过原位活化calpain后，研究大鼠脑组 8 的表达情况，以明确calpain的活化是否会导致stargazin及TARP—y8免疫活性的 变化。 方法：实验采用生后4周的SD雄性大鼠(n=4)，断头取脑后直接制作冰冻切片(20 um)，给予含有氯化钙或者calpain抑制剂的缓冲液进行预处理，采用免疫组织化学 染色的方法，光镜下观察stargazin及TARP—Y8在各部分脑组织的表达情况。并且 对不同预处理后的冰冻切片进行western 及TARP—Y 8蛋白的表达情况。最后，为进一步论证实验结果，直接使用calpain活 化脑细胞膜成分，使用western