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- 2016-03-11 发布于贵州
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ctla4ig因修饰的树突状细胞诱导哮喘免疫耐受的实验研究
CTLA4Ig基因修饰的树突状细胞诱导哮喘免疫耐受的实验研究
中文摘要
第一部分腺病毒转导CTLA4Ig基因修饰树突状细胞
目的:构建CTLA4Ig基因修饰的树突状细胞,观察基因转导对树突状细胞表型的影响。
方法:小鼠骨髓来源的细胞悬液,在GM.CSF和IL.4作用下,体外培养7天。光学
显微镜下观察细胞生长状况和形态学变化。流式细胞仪鉴定细胞表型,确定是否为树
及OVA共孵育48小时,荧光显微镜观察细胞内目的基因表达,流式细胞仪测定转染
效率。
结果:1、小鼠骨髓来源的细胞培养第7天可见树突状细胞特征性的树枝状形态和细
胞集落形成。2、流式检测发现64.01%的细胞为CDllc阳性的未成熟的DC;33.49%
CDllc+MHCII+细胞。3、与重组腺病毒和OVA共孵育48小时后,荧光显微镜下可观
察到树突状细胞内发出绿色荧光。流式细胞仪分析检测显示AdCTLA4Ig转染率为
CDllc+MHCII+细胞。
结论:成功构建了CTLA4Ig基因修饰的树突状细胞。
关键词树突状细胞CTLA4Ig基因修饰
第二部分CTLA4Ig基因修饰的树突状细胞的体外功能研究
突状细胞表达细胞因子IL.10、IL.12的影响以及对刺激T细胞活化增殖功能的影响。
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