mir-29b调控mcl-1影响胃癌细胞生物学行为的初步研究.pdfVIP

摘要 摘要 miI斟As是一类大小约22个核苷酸(ntS)的内源性非编码小RNAs，通过与 mRNA37UTR完全或不完全互补结合降解靶mRNAs或抑制其翻译，参与细胞增 殖、分化、代谢和凋亡等过程。前期研究发现miR．29c在胃癌中的表达量明显下 降，并预测抗凋亡基因Mcl．1为miR-29的靶基因之一，其在胃癌组织中高表达并 与miR-29c的表达呈反比相关。 · 本研究构建相关载体并应用荧光素酶报告基因技术进一步证实miR．29b／c与 Mcl．1靶向作用关系。用WeStemblot检测10例胃癌组织中Mcl．1蛋白表达情况。通 blot分别检测Mcl．1m砌蛆和Mcl．1蛋白的表达变化，并采用WTT试验，DAPI染色， 流式细胞术检测其对细胞增殖、凋亡、细胞周期和药物敏感性的影响。 结果发现，胃癌组织中Mcl．1蛋白表达下降，miR-29b／c可以通过直接作用于 Mcl．137UTR，进而影响Mcl．1mRNA和蛋白在胃癌组织中的表达水平。过表达 miR．29b，c可抑制细胞的增殖，促进BGC．823胃癌细胞凋亡，使细胞周期受阻于S 期，同时可以增加胃癌细胞对化疗药物DOC的敏感性，使化疗药物更有效的发挥 抑制和杀伤作用。 关键词：miR-29b／c；Mcl．1；胃肿瘤 Abstract Abstl鼍ct miRNAsa∞ endogenous～22nucleotide(nt) RNAstIlatcan non·coding mRNAsor 0r degradate伽苫et d印ress仃anslationbyperfect t0the impe—．ectbinding 3’-UTR t0 mRNAscmcialrolesiIlvariouscellular ofta玛et play such嬲 processes 粕d research prolif-eration，dif俺rentiation，metaboliSm had 印0ptosis．Previous that miR-29b／c suggested eXpression、Ⅳere decre弱edi11 cancer significamly gastric tissues锄d Mcl_l 0neof ofmiR-29． predictedallti印0ptoticgene啪s taI．getgenes leVelofMcl—l Expression mRNA in canceralld w嬲up-regulationgastric negatively rclated幻miR-29c expression． hltllis w懿usedt0me豁urethe study，Iuciferasereportcr私saysystem