hiv感染者不感染阶段自然杀伤细胞功能的变化.pdf

材料和方法………．．：…………………………………．15 实验结果………………．．……………………………．18 讨论………．．．……一………………………………．．28 结论…………………………………………………．3l }『i{、本研究创新性的自我评价…………………………‘………．32 fi、参考文献……………………：………………………．．3：{ 人、附采 综述……………………………．．j．’…………．’……．．36 致阱…………………………………………………．{g 个人简介……………………………。…………………．50 化 是由 重传 是无 法攻克的难题。研究表明，在HIV感染过程中，免疫系统一方面受到病毒感染 killer ．的损害，另一方面发挥抗病毒的功能，抑制病毒复制。自然杀伤细胞(natural cell，NK)是天然免疫系统中的重要效应细胞，在控制肿瘤和微生物感染中发挥 重要作用。目前，关于HIV慢性感染嚣NK细胞功能变化的研究结果不尽相同。 HIV ·另外，关于HW原发感染者(primary term 细胞数量和亚群分布与欧美国家人群不同，因此对我国HIV感染者NK细胞功 能的研究非常重要。NK细胞作为机体抗肿瘤和感染的第一道防线，在获得性免 疫应答之前就发挥免疫作用来保护机体，同时也是连接天然免疫和获得性免疫的 桥梁，因此研究NK细胞功能在HIV疾病进展中的变化具有重要的科学意义。 酶B对HW感染者NK细胞分泌抗病毒细胞因子IFN-),功能以及细胞毒性功能 进行研究。 方法 1、研究对象 选取未接受过抗病毒治疗的HIV感染者，按感染时间不同选取HIV原发感 为13例随机抽取的HIV抗体阴性、未暴露于HIV的健康人，性别、年龄均与 HIV感染者匹配。 2、CD4+T细胞绝对值的检测 BD公司CD4FITC／CD8PE／CD3 将201xl PerCP试剂加入绝对计数管中，逆 向加样法加入50p．1混匀的抗凝全血，室温避光1 5min，加入1×免洗溶血素4501d， 5min，应用FACS 室温避光1 Calibur流式细胞仪迸行检测，MultiSET软件分析 结果，得到CD4+T淋巴细胞的绝对值。 3、NK细胞功能实验 复苏冻存的人外周血单个核细胞，孵育过夜。与缺乏MHC．I类分子的K562 Fixation／Permeabilization 使用BD Kit(美国BD公司)进行 Cytofix／CytopermTM 分钟。用1％多聚甲醛固定。 4、HIV病毒载量测定 Test试剂盒 在Roche 行全自动PCR反应体系制备及病毒载量检测。 5、统计学分析 应用SPSSl1．5软件包进行统计分析，所有数据以中位数表示，两组间实验． 指标的比较采用Mann-Whitney U检验，相关性分析采用Spearman秩相关检验， P≤O．05为有统计学意义。