第七章花药和花粉培养摘要.pptVIP

（二）花粉培养技术 1、取材时期：四分体时期到单核早期。 2、花粉的分离： 3、小孢子纯化： 对获得的小孢子混合物进行分级过筛、梯度离心处理纯化小孢子 4、花粉的培养 1）自然散落法(漂浮培养自然释放法) ： 将花药接种在预处理液或液体培养基上，待花粉自动散落后，收集培养。 2）机械游离法 a.磁搅拌法：用磁力搅拌器低速搅拌培养液中的花药，使花粉游离出来； b.挤压法：在烧杯或研钵中挤压花药，将花粉挤出后收集培养。 花粉培养方法 1、直接培养：花粉置琼脂固化培养基上培养。 2、预培养：花药在液体培养基中先培养2-4d，然后挤出花粉，经离心洗涤后悬浮于液体培养基中培养。 3、双层培养：先铺一层琼脂固体培养基（加入失活花药的浸提液），凝固后，在其上接种密度为1*104的花粉悬浮液，接种量以1mm层厚为宜。 4、看护培养：利用花药或花药愈伤组织释放出的活性物质促进花粉小孢子发育。 5、微室培养：利用小的盖玻片和凹穴载玻片形成微室进行花粉培养。 看护培养图解 四、花药和花粉培养中的白花苗现象 白化苗的控制 花粉发育时期：花药培养中，白花苗的比例随接种时花粉发育时期的延迟而提高。 培养基成分：高浓度的2,4-D会使花粉愈伤组织分化出更多的白化苗 培养温度：当培养温度提高时，白花苗的数目也随之增加。 * * 小孢子母细胞经减数分裂产生4个一群的单倍体细胞，这个发育