人胎脑神经干细的体外分离、培养与鉴定.pdf

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人胎脑神经干细的体外分离、培养与鉴定

目 录 缩略词中英文对照表1 中文摘要2 英文摘要3 论文正文 人胎脑神经干细胞的体外分离、培养与鉴定 前言5 材料与方法8 结果12 讨论19 结论27 参考文献28 附录33 致谢34 综述 神经干细胞相关研究进展36 参考文献41 缩略词中英文对照表 英文缩写 英文全称 中文全称 NSCs neural stem cells 神经干细胞 EGF epidermal growth factor 表皮生长因子 bFGF basic fibroblast growth factor 碱性成纤维生长因子 NGF nerve growth factor 神经生长因子 NSE neuronal specific enolase 神经元特异性烯醇化酶 GFAP glial fibrillary acidic protein 胶质纤维酸性蛋白 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 D-Hanks Dulbeccos Hanks balanced salt D-Hanks平衡盐溶液 solution DMEM/F12 Dulbeccos modified Eagle medium: Dulbecco改良的Eagle培 nutrient mixture F-12 养基:营养混合物F-12 FITC fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 CD cluster of differentiation 分化抗原 BrdU 5-bromodeoxyuridine 5-溴脱氧尿苷 1 人胎脑神经干细胞的体外分离、培养与鉴定 中文摘要 背景与目的:中枢神经系统的许多疾病,如脑和脊髓的损伤、脑出血、脑缺血性 卒中、帕金森病、老年性痴呆病等都存在不同程度和方式的神经细胞缺失或变性 死亡,并由此引起神经功能的损害。这些疾病所致的神经功能损害采用目前传统 的治疗效果多不显著,神经干细胞的发现与移植研究进展为其治疗带来了新的思 路和方法。 本实验旨在探索人胎脑神经干细胞的体外分离培养条件,从而在体外大量增 殖神经干细胞;并观察神经干细胞增殖和分化的特点。 方法:采用包含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮细胞生长因子(EGF)的无血 清培养技术,从8-16周自愿水囊引产人胎脑皮质中分离出神经干细胞,并进行培 养、传代、分化观察,应用免疫荧光细胞化学技术对培养的细胞及其分化的细胞 进行鉴定 结果:从8-16周人胎脑皮质中成功分离出

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