分化型甲状腺癌lt;#39;131gt;ⅰ辐射后失分化相关机制的实验研究.pdf

131 分化型甲状腺癌 I辐射后失分化相关机制的实验研究 摘 要 131 目的：通过对甲状腺滤泡状癌细胞株 FTC-133I辐射后摄碘能力 131 的改变、碘代谢相关的甲状腺特异蛋白及mRNA的改变的研究，明确 I 131 辐射与分化型甲状腺癌细胞摄碘能力变化、 I辐射与分化型甲状腺癌细 131 胞失分化的关系和相关机制；并通过 I辐射的方法获得失分化的 FTC-133细胞株。 方法：体外培养分化型甲状腺滤泡状癌细胞株 FTC-133，用放射性 131 125 I（不同剂量，不同时间）辐射后，检测细胞吸碘（ I）率的变化。对 辐射前后的细胞，分别用实时荧光定量聚合酶链反应（Realtime-PCR） + - 方法检测钠碘转运体（Na/I symporter，NIS）、TSH受体（Thyroid stimulation hormone Recepter，TSHR）、甲状腺球蛋白（thyroglobin， TG）和甲状腺过氧化物酶（Thyriodperoxidase，TPO）mRNA相对含量， 用蛋白质印迹法 （western blot）检测NIS、TSHR、TPO蛋白含量，放射 免疫测定法 （radioimmunoassay，RIA）测定TG蛋白含量，用免疫荧光 染色方法检测上述蛋白在细胞内的定位，并做比较。筛选摄碘能力下降 最明显的细胞群，通过有限稀释单克隆培养法获得摄碘能力稳定下降的 单细胞克隆，建立失分化的FTC-133细胞株，检测 NIS、TSHR、TPO和 TGmRNA含量、蛋白含量和定位，与原细胞相比较，并观察细胞形态的 变化。 131 125 结果： I辐射使FTC-133细胞摄 I能力(cpm/min值)下降，各实 验组与对照组相比差异有统计学意义(P0.05)，利用15μCi照射48小 时吸碘率下降最明显，下降率为 34.6％（t＝12.72，P0.01）。辐射后 NIS、TSHR、TPO、TG蛋白以及mRNA含量均下降，在48小时下降最明显， 与对照组相比差异具有统计学意义（P0.05），蛋白定位无明显变化。获 得的失分化FTC-133细胞，摄碘能力明显下降，NIS、TSHR、TPO、TG蛋 白含量和 mRNA含量明显下降，与对照组相比差异具有统计学意义 （P0.05）。 131 结论： I辐射可以使FTC-133细胞碘摄取能力的下降，同时使甲状 131 腺特异性基因NIS、TSHR、TPO、TG及蛋白表达下降。 I的辐射导致吸 碘率的下降是与碘摄取和代谢有关的一些列分子共同作用的结果，这种 131 变化一种失分化现象。在国际上首次利用 I辐射的方法获得失分化的 FTC-133细胞株，可用于进一步实验研究。 131 关键词：分化型甲状腺癌，FTC-133细胞， I，失分化，机制 EXPERIMENTALSTUDY OF MECHANISMOFDEDIFFERENTIATION OFDIFFERENT 131 AFTERIRADIATION ABSTRACT Objective: