心肌细胞培养液鼻咽癌细胞cne-2增殖的影响及其机制的研究.pdf

目 录 心肌细胞培养液对鼻咽癌细胞 CNE-2 增殖的影响及其机制的 1 研究„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1 1.1 中文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„2 1.2 英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4 1.3 前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„5 1.4 材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„12 1.5 结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„2 1 1.6 讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„25 1.7 结论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„30 1.8 参考文献„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„31 1.9 英汉缩略词对照表„„„„„„„„„„„„„„„„„35 2 致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„36 3 心肌细胞增殖的研究进展 （综述）„„„„„„„„„„37 1 心肌细胞培养液对鼻咽癌细胞CNE-2 增殖的影响 及其机制的研究 摘 要 本课题组前期研究体外已经证实心肌细胞培养液能明显抑制鼻咽癌细 胞的生长，对非肿瘤细胞无抑制作用，推测心肌细胞培养液中可能含有一 种或几种安全有效的抑瘤活性物质，该抑瘤活性无浓度依赖性。体内实验 研究发现心肌细胞培养液能抑制 S180 小鼠移植瘤生长，不影响小鼠的正常 生长；在 CNE2 裸鼠移植瘤模型得到了相同的答案，证实了该抑瘤活性物质 的安全性和有效性，并进一步研究发现其抑瘤机制与诱导肿瘤细胞凋亡有 关，同肿瘤微血管的生成无关；经葡聚糖凝胶层析分离提纯及质谱鉴定推 测心肌细胞培养液中抑瘤活性成分中可能含有 EIF-5A 或该蛋白的裂解片 段。 目的：通过体外抑瘤实验探讨心肌细胞培养液（myocardial cells culture medium ，CMCM ）对人鼻咽癌低分化鳞癌细胞系生长的影响，并对其抑 瘤机制进行探讨。 方法：分别于 CMCM 作用于 CNE-2 细胞 12 小时、24 小时、36 小时、 48 小时、60 小时、72 小时采用 MTT 法检测细胞的存活情况，同时以顺铂 （DDP 1.26 μg/ml）作为阳性对照，RPMI1640 培养基作为阴性对照，计 算出细胞存活率，绘制生长曲线；并在作用 24 小时时采用流式细胞仪检测 各组 CNE-2 细胞的周期分布及凋亡情况。 x 结果：作用 12 小时后 CMCM 组与 DDP 组细胞存活率 （±s ，% ）分 别为 87.27±6.99、89.88±0.72 ，与阴性对照组 100.00±4.06 相比便存在显著 2 差异（P0.05 ）。随着时间的延长，差异逐渐增大， 72 小时后差异达最大， x CMCM 组与 DDP 组细胞存活率 （±s ，% ）分别为 21.45±2.45 、12.72±1.52， 与阴性对照组 100.00±10.69 相比，差异均具有统计学意义。各实验组分别 作用于鼻咽癌细胞 24 小时后，流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡情况。 x CMCM 组 G0/G1 期细胞比率 （±s ，% ）为 68.70 ±3.40，与阴性对照组 50.16±2.92 相比，差异具有统计学意义，DDP 组 G0/G1 期细胞比率为 47.97 ±1.87，与阴性对照组相比，差异无统计学意义。DDP 组 G2/M 期细胞比 x 率 （±s ，% ）为 22.10 ±2.67 ，明显高于阴性对照组 6.60 ±2.03 （P0.05 ）， CMCM 组 G2/M 期细胞比率为 8.10 ± 1.78，与阴性对照组相比，差异无统 x 计学意义。细胞凋亡率 （±