人btla的原表达、多克隆抗体制备及其在肺癌和结直肠癌组织中表达的研究.pdf

人BTLA的原核表达、多克隆抗体制备及其 在肺癌和结直肠癌组织中表达的研究 摘 要 andT B、T淋巴细胞弱化因子(B lymphocyte 年发现的CD28家族共抑制受体，主要表达于T、B细胞，在DC、单核细胞及 NK细胞上也有表达，能负性调节T、B细胞的激活与增殖，维持树突状细胞在 内环境中的稳定，抑制记忆性CD8+T细胞的分化，其在肿瘤患者体内T细胞上 高表达，提示在肿瘤的发生发展中发挥作用。为了进一步研究BTLA在肿瘤发生、 发展中的作用，我们拟构建人BTLA(1出TLA)原核表达载体和表达蛋白并制各 多克隆抗体，通过免疫组化法检测肺癌和结直肠癌组织中BTLA蛋白的表达，并 分析其在肿瘤的发生、发展和侵袭转移中的作用。 【目的】 构建BTLA原核表达载体，诱导表达hBTLA融合蛋白，并经亲和层析法纯 化，将其作为抗原免疫家兔，制备兔抗hBTLA多克隆抗体，纯化抗体后，在蛋 白水平检测该分子在肺癌和结直肠癌中的表达情况，并分析BTLA基因在肿瘤的 发生、发展中的作用。 【方法】 1．构建含hBTLA胞外区目的基因的T载体克隆及原核