羊布鲁氏菌m5omp31-2基因原核表达载体的构建及表达.pdf

。 中 文 摘 要 的原核表达载体，诱导目的蛋白的表达，为后续研究奠定一定的实验基础。方法根据 M5菌株基因组为模板，经PCR方法扩增目的基因，将目的基因与载体pMDl9一T连接， ’得到重组质粒pMD—omp31-2，分别采用PCR和酶切的方法鉴定重组质粒。重组质粒 经双酶切后，用14 DNA连接酶将目的基因与原核表达载体pET32a连接，得到重组载体 结果 76％；该基因与国际标准菌株羊种、犬种omp31—2基因核苷酸序列同源性达99．86％， 与国际标准菌株猪种、沙林鼠中、海洋种相应基因核苷酸序列完全相同。(2)成功构建原 核表达载体，并诱导目的基因的表达。结论 成功地构建了羊布鲁氏菌M5菌株omp31 —2基因的原核表达载体，并诱导目的基因的表达，为后续研究奠定了一定的实验基础。 关键词羊布鲁氏菌施株omp31-2基因克隆原核表达 9 Constructionand of Expression