耳蜗内毛细胞特性mlck基因敲除小鼠的听力学及内耳形态学研究.pdfVIP

耳蜗内毛细胞MLCK基因敲除小鼠的听力学及内耳形态学 研究 内容摘要 细胞骨架结构发生改变可以导致听觉功能障碍，常见的有Usher综合症等。 在细胞骨架的重组过程中，MLCK基因扮演了重要的角色。肌球蛋白具有促使 肌动蛋白转运的功能，而肌球蛋白的磷酸化及重组都需要MLCK基因作为激酶 的参与。基于以上的理论，我们构建了一种内耳毛细胞MLCK基因特异性敲除 的小鼠模型来观察MLCK基因在内耳声音传导方面的作用。通过对基因敲除小 内毛细胞的表皮板上出现了泡状突起，但是在透射电镜这种表现观察的不是很明 显。通过这些检测结果，证明了MLCK基因可能在内耳的声音传导过程中起到 一定的作用。本实验对MLCK对内毛细胞的作用进行了初步研究。包括一下三 个部分。 第一部分模型构建及敲除效率检测 在应用模型进行MLCK基因功能研究前，我们首先要确定该模型的可靠性和 敲除基因的准确性。只有在确定动物模型成功建立后，才能够保证接下来的功能 学和形态学研究最终结果的科学性。免疫组织化学荧光显示在新生的K0小鼠内 耳毛细胞内有强烈的荧光显色，而野生小鼠内毛细胞内没有检测到荧光信号。这 证明了在小鼠内毛细胞的确没有基因的表达，耳蜗内毛细胞特异条件基因敲除小 鼠动物模型成功建立。 第二部分内耳形态学观察一扫描电镜和透射电镜 在成功验证了实验小鼠的敲除效率之后，就要进行形态学的相关