pi3k抑制剂y294002对人晶状体上皮细胞增殖的影响.pdfVIP

个人简介…………………………………………………………………………31 ·中文论著摘要· P13K抑制剂LY294002对人晶状体上皮 细胞增殖的影响 -_■■‘●_●■一 刖 罱 后发性白内障是现代白内障手术后最常见的并发症，可引起视力的再次低下， 又称后囊膜混浊【¨(posteriorcapsular 体上皮细胞(1ensepithelialcells，LECs)发生增殖、迁移、纤维化生并伴随细胞外基 质的分泌是PCO形成的主要原因【2】，而晶状体上皮细胞的增殖最为关键。多年来 国内外学者一直致力于通过药物等方法抑制晶状体上皮细胞增殖的研究。 kinase／AKT，磷脂酰肌醇一3激酶／蛋白激酶B)信号通路对细胞的生长、 dylinositol-3 存活、增殖及凋亡均有重要调控作用【31，而LY294002作为该信号通路的特异性抑 制剂，能够抑制细胞的增殖。S期激酶相关蛋白2(S kinaseassociated phase proton 2，Skp2)作为该通路下游的靶调控因子，能够介导细胞周期因子降解而调控细胞 的增殖【4】。本研究应用P13K抑制剂LY294002处理体外培养的人晶状体上皮细胞 株SRAOI／04，观察其对细胞增殖的影响及研究可能的相关机制，为临床后发性白 内障的预防和治疗提供新的理论依据。 材料与方法 一、材料 人晶状体上皮细胞株SI认0I／04由北京中国科学院肿瘤研究所提供。 二、方法 培养液中，置于37℃、5％C02、饱和湿度细胞培养箱内传代培养。 2、细胞分组，实验组加入25 等体积DMSO。 细胞增殖的影响，绘制生长曲线，筛选LY294002的最佳作用时间。 胞周期的影响。 蛋白表达的影响。 mRNA表达的影响。 三、统计分析 实验数据采用SPSS11．5统计学软件进行分析。各组数据以；妇表示，统计学 分析应用t检验，P0．05认为差异有统计学意义。 结 果 1、P13K抑制剂LY294002抑制人晶状体上皮细胞的增殖 MTT法检测得出：实验组吸光度(A)值较对照组下降，差异有统计学意义 h细胞生长抑制率分别为19．6％、 俨O．05)。HLEC生长速率明显减慢，在12、24、36 33．8％和24．2％。 O．05)。 Western blot法检测得出：实验组细胞Skp2蛋白表达量明显减少，与对照组 比较，差异有统计学意义(尸O．05)。 2 实时RT-PCR法检测得出：实验组细胞Skp2mRNA的表达量降低，与对照组 比较，差异有统计学意义(P0．05)。 结论 1、P13K抑制剂LY294002抑制人晶状体上皮细胞株SRAOI／04的增殖。 2、LY294002抑制细胞中Skp2表达，使部分细胞阻滞于细胞周期G1／S期。 关键词 P13K抑制剂LY294002：人晶状体上皮细胞；细胞增殖；细胞周期；Skp2： 后发性白内障 3 ·英文论著摘要· EffectofP13Kinhibitor LY294002on of proliferation humanlens ceils epithelial