一种新cd44异体在乳腺癌耐药细胞株中表达及其对乳腺癌细胞株生物学行为的影响
江苏 大学硕士论文
摘 要
目的:1.构建人CD44基因变异体(CD44
中,为深入研究CD44v基因的功能奠定基础。2.将人乳腺癌多药耐
BankNo.FJ216964)
药细胞株(MCF.7/Adr)中新发现的CD44v(Gene
殖方面的差异。
I齐HEcoR
RT-PCR,获得全长cDNA模板,使用含有限制性内切酶Kpn
I酶切位点引物进行PCR反应,从而获得带有酶切位点CD44基因产
物,PCR产物于1%琼脂糖凝胶电泳后切胶回收,并参照胶回收试剂盒
vector上,TA克隆后,提取质粒并测定含量及进行双酶切反应
simple
I和EcoR1分别双
验证,将含阳性质粒转化菌进行DNA测序。4.Kpn
接,大肠杆菌扩增,小提质粒后酶切鉴定,阳性质粒进行测序验证。
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