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一氧化碳中毒小鼠脑内CBS的动态研究 硕士生姓名： 李淑敏 指导教师： 王苏平 教授 指导小组： 王晓虹 讲师 专业名称： 神经病学 摘 要 背景：一氧化碳(carbonmonoxide，co)是一种无色、无味、无臭、 无刺激性的有毒气体，是生活和生产中造成中毒性死亡最常见的窒息性 气体。CO中毒可造成中枢神经系统及心血管系统功能损害为主的全身各 组织细胞的损伤。部分患者在中毒症状缓解、意识恢复正常后，大约经 历2．60天表现正常或基本正常的假逾期后，出现以痴呆、精神和锥体外 系症状为主要表现的神经系统疾病，称为一氧化碳中毒迟发性脑病 aftercarbonmonoxide (Delayedencephalopathy 发病率国内为1O一30％，国外为O．8．43％¨1，是CO中毒严重情况。有关 CO中毒迟发性脑病发病机制的研究，迄今为止已提出了多种假说，但其 发病机制仍不十分清楚。 sulfide，H2S)被发现是继NO、 20世纪80年代末，硫化氢(hydrogen CO之后的第3种气体信号分子眈’3’，并发现在脑内具有重要的生理作 用¨。1。H2S选择性地增强NMDA受体介导的反应，并改变对海马的长 时程增强(LTP)作用的诱导；调节下丘脑CRH释放；松弛脑血管平滑 肌：具有抗氧化应激作用等。内源性H2S由半胱氨酸在5’一磷酸．吡哆醛 作用下产生。其中，CBS高度表达于神经系统，是脑内生成H2S唯一的 而钙调蛋白(CaM)是CBS的快调节途径。 酶，调节H2S的生成161 H2S与NO，CO在多种病理生理过程具有极为相似的特性‘6,71，在体内 形成复杂的气体信号调节网络。已有实验证实‘81，H2S在脑缺血模型中 起保护作用，而CO中毒后神经系统内H2S的变化及相关机制尚无明确 报道。本研究将初探小鼠急性CO中毒后脑组织内CBS和CaM的动态表 发生中的作用。 目的：在动物实验的水平上观察急性CO中毒后脑内CBS的变化， 以期能够推测H2S在DEACMP形成机制中的作用。 方法：健康昆明系雄性小鼠l62只，随机分成空气对照组，CO中毒 组，丁苯酞干预组，每组各54只。每组各分成9个亚组分别为：6d时(h)、 1天(d)、2d、3d、4d、7d、14d、21 d、28d，每组各6R小鼠。空气对照 组以等量空气腹腔注射；CO中毒组用单次腹腔注射式染毒法建立急性 CO中毒模型；丁苯酞干预组先建立CO中毒小鼠模型，造模清醒后即给 予丁苯酞注射液(1 ml／Kg，bid)腹腔注射。依各时间点断头取各组小鼠脑 组织，免疫组化法检测海马区CBS和CaM的表达变化。 结果： 1、空气对照组小鼠海马区CBS各时间点HIS值表达无显著差别。 毒后14d(HIS值4．33±1．51)，而后再次呈现逐渐下降趋势。丁苯酞组 小鼠海马区CBS的IHS值在初始的2天内下降不明显，于2d时达最低 d和 高峰值出现在干预后7d(HIS值3．83±2．04)，以后逐渐下降，于21 1d 和28d有统计学差异(P0．05)，于14d有显著性统计学差异(P0．01)。 CO组和丁苯酞组各时间点IHS值比较于1d、2d和14d有统计学差异 (P0．05)。 2、空气对照组小鼠海马区的CaM各时间点HIS值表达无显著差别。 CO组小鼠海马区CaM呈现两阶段的变化，先呈下降趋势，于2d达低点 (HIS值4±1．26)，以后逐渐升高，14d达高峰(HIS值6．67±1．97)， 以后再次下降。丁苯酞组小鼠海马区CaM的IHS值下降不明显，2d达 低点(HIS值1．3 1