化学处理和热处理脱除苹果潜隐性病毒研析.pdfVIP

摘 要 苹果茎沟病毒（Apple stem grooving virus ，ASGV ）、苹果茎痘病毒（Apple stem pitting virus ，ASPV ）、苹果褪绿叶斑病毒（Apple chlorotic leaf spot virus ，ACLSV ） 是苹果上 3 种重要的潜隐性病毒，广泛分布于世界各苹果种植区。这 3 种病毒通常 不表现明显症状，但影响树势，降低产量。栽培无病毒苗木是杜绝这类病毒危害的 主要途径，化学处理和变温热处理是获得苹果无病毒种质的重要方法。本研究以 22 个苹果品种和砧木的继代苗为试材，以 RT-PCR 技术为检测手段，探讨 3 种化学药 剂处理和热处理对试材的生长状况及脱毒效率的影响，进一步了优化传统的脱毒体 系，提高了脱毒效率，主要结果如下： 1 在培养基中添加不同浓度的阿昔洛韦、病毒灵和病毒醚 3 种化学药剂对苹果 茎尖进行常温暗培养，处理 40d 后取 2mm 茎尖继代培养，40d 后利用 RT-PCR 方法 进行病毒检测，结果表明，阿昔洛韦和病毒灵的最佳浓度分别为 60mg/L 和 40mg/L ，在此浓度下，苹果茎痘病毒和苹果褪绿叶斑病毒的脱除率均达到 100%， 而苹果茎沟病毒的脱除率分别为 63%和 62% 。病毒醚的最佳浓度为 10mg/L，在此浓 度下三种潜隐性病毒的脱除率均达到 100%。病毒醚、阿昔洛韦和病毒灵的脱除效率 分别为 230.5% 、169.47%、143.22%。 2 10mg/L 病毒醚处理条件下，无论是热处理还是常温培养，在暗培养条件下， 三种潜隐性病毒的脱除率均达到 100%，显著高于光培养的脱毒率，并且由于增殖系 数和茎尖分化率的不同，暗培养的脱毒效率均显著高于光培养；无论是在光培养还 是暗培养条件下，热处理的脱除率均显著高于常温培养。 3 在暗培养结合热处理的条件下，6-BA 和 GA3 的最佳浓度分别为 2.0mg/L 和 0.3 mg/L，在此浓度下 ACLSV 和 ASPV 的脱除率均为 100%，ASGV 的脱除率均为 95%，脱除效率分别提高了 273.9%和 109.5%； NAA 的最适浓度为 0.4mg/L，脱毒 率为 90%，但由于增殖系数的下降，其脱毒效率反而降低了 54.2% 。 4 不同苹果品种和砧木类型组培苗对热处理结合暗培养脱毒反应不尽相同。试 验结果表明：不同的苹果品种和砧木耐热性差异明显。其中王林、乔纳金、嘎拉、 金冠、珠美海棠、P22 的耐热性最强；GM256 、弘前、SH 系耐热性最差；惠民短枝富 士、浓红富士、天红 1 号、B 、M 、P 、77-34、天红 2 号、Jazz 的耐热性居中。 9 9 59 在相同处理下不同的苹果基因型脱除苹果潜隐性病毒的效果存在差异，惠民短枝富 士、SH 、M 、弘前、GM 脱毒效率最高；77-34、P 、P 、天红 1 号次之；乔 17 9 256 59 22 纳金、SH40 、SH38 、浓红富士的脱毒率最低。另外在相同的条件下，同一试材不同 病毒的脱除率也存有差异，ACLSV 最容易脱除，ASGV 最难脱除，ASPV 居中。 5 比较了 22 个苹果品种和砧木组培苗对 10mg/L 病毒醚脱毒的反应。结果表 明，不同的苹果品种和砧木抗药性差异显著。嘎拉、弘前、珠美海棠、B 、P 、 9 22 P59 、77-34、GM256 、M9 抗药性最强；SH17、天红 2 号、天红 1 号、惠民短枝富 士、SH29 、SH40 、SH38 、王林、乔纳金次之；金冠、浓红富士、SH28 、Jazz