慢性充血性心衰实验大鼠的认知功能变化及其大脑海马区葡萄糖脂肪氨基酸代谢及其神经递质类基因表达规律研析.pdf

内容摘要 本研究从中医学整体观“心主血脉、心主神明”的思想出发，研究 慢性心衰心气虚证时大脑的认知功能变化。 本研究工作首先从文献的角度，对临床上充血性心衰(cHy)伴随认 知功能的变化进行了综述。在此基础上，利用大鼠冠状动脉前降支结扎 后出现CHF以及伴随的血瘀、心气虚及心阳虚的中医证型演化(前期基 后CHF不同时期的空间学习记忆能力。此外，利用基因表达芯片，进一 步研究了该状态下大脑海马区和皮质区的基因变化规律。基因芯片数据 的前期分析采用Gene GENE BANK(大鼠基因数据库)等相关公共数据库。 本研究的主要结论： 死亡)时分别测定其血流动力学指标，结果表明术后各个时期大鼠 分别为(180．1±56．8) ml／min／kg ±19．2)ml／min／kg(n=3)。 大鼠的空间学习和记忆能力，没有发生明显变化。术后10天、术后 III 90天和CHF终末期大鼠的空间学习和记忆功能发生了明显变化。各 比假手术组长；搜索策略，手术组的认知较好率为(96／128，75。O％)， 终末期组：大鼠全部9组次训练的平均对数潜伏期，终末期为(1．606 明显比对照组长；搜索策略，终末期的认知较好率为(13／70，18．6％)， 均对数潜伏期明显缩短，差异显著；搜索策略方面，L-NNA组总的 3．本实验共使用13张R40s芯片，其中每张芯片总基因数为4096条， 本研究采用重复基因芯片的方法进行芯片假阳性率的控制，即分析 的基因为两张(及以上)芯片同时为阳性的基因(共43条)，将只 有一个有效数据的阳性基因或只有一个数据为阳性的基因(共69 条)，从总的阳性基因(共112条)中剔除。其中，一张芯片使用的 总RNA取材自1只大鼠，另一张芯片使用的总RNA取材自同组的2 只大鼠合并后的总RNh。芯片实验共分三组：术后10天组、术后60 Ⅳ 天组和术后90天组。 4．大鼠海马和皮质区的基因芯片阳性数据结果：已知的637条基因中， 术后10天组海马区阳性表达基因有24条，皮质区1条；术后60天 组海马区阳性表达基因有14条；术后90天组海马区阳性表达基因 有4条。在三组中的所有阳性基因，除了术后60天有2条基因表现 为上调，其余均表现为下调； 5．基因芯片分析结果：①心梗CHF形成期(术后10天组)海马区， 存在较明显的葡萄糖、脂肪酸和氨基酸代谢类基因的阳性表达：CHF 基因，这条基因所控制的蛋白质是在大脑糖／能量代谢过程中起关键 作用的酶，是糖酵解过程中重要的限速酶，该基因的表达下调，提 示CHF后10天海马区的糖／能量代谢出现障碍；脂肪酸代谢类基因 的阳性表达有催化脂肪酸氧化后生成酮体过程的最后一步反应酶一 天出现下调。脂肪酸13氧化生成的乙酰辅酶A在进入酮体生成途径， 再进入三羧酸循环，为大脑进行供能过程中，3一羟3一甲基辅酶A裂 解酶的基因控制该反应的最后一步，因此该条基因的表达下调，提 示大脑的脂肪酸B氧化后后成酮体生成过程出现障碍；在氨基酸代 013 谢方面，谷氨酸草酰乙酸转氨酶2基因(NM177)在术后10天 表达下调。该基因在氨基酸的转氨基作用中起重要作用，尤其是影 响谷氨酸和天冬氨酸的代谢，而这两个氨基酸同时还是大脑重要的 兴奋性神经递质；②心梗CHF形成期(术后lO天组)海马区，存 在较明显的神经递质类基因的阳性表达：心梗CHF形成期(术后10 天组)海马区，除了影响谷氨酸和天冬氨酸代谢的谷氨酸草酰乙酸 基因(NM 脑的神经递质变化关系密切；③心梗后CHF形成期海马区神经鞘脂 代谢