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CD40L 与胰岛素抵抗相关性研究 摘 要 背景： 代谢综合征是一类集中心性肥胖，糖、脂代谢紊乱，高血压等多种 代谢异常于一身的临床综合征。慢性炎症、血小板活化、血管内皮损伤 也是代谢综合征的组成成分。目前普遍认为胰岛素抵抗是代谢综合征发 病的中心环节。胰岛素抵抗可以导致血小板活化、血管内皮损伤、血栓 形成，从而促进心血管疾病的发生。 CD40L （CD40 ligand ）是一种分子量为39KD 的II 型跨膜蛋白，属 于肿瘤坏死因子基因超家族成员。是新兴的研究慢性炎症、血小板活化 的指标。 既往对于胰岛素抵抗与CD40L 的研究大多是横断面调查，并没有进 一步行干预实验来证实两者之间的关系。故设想在本次试验中不仅观测 胰岛素抵抗动物模型中的CD40L 的变化。并通过罗格列酮干预治疗，改 善胰岛素抵抗后，观测 CD40L 变化，进一步说明胰岛素抵抗和 CD40L 的关系。有望使CD40L 成为新的反映胰岛素抵抗状态下慢性炎症、血小 板活化的观测指标。 本文将分三部分对上述问题进行阐述： 第一部分： 胰岛素抵抗大鼠模型的建立： 目的： 通过高脂、高热量饲料喂养诱导大鼠出现腹型肥胖、高甘油三酯血 症、高胰岛素血症，从而成功建立胰岛素抵抗动物模型。 方法： 健康SD 6 周龄大鼠60 只，按体重随机分为普食组（C, n=15 ）、高 脂组（HF, n=45 ）。C 组喂以基础饲料，HF 组喂以高脂饲料。0 周时测定 空腹血糖、空腹胰岛素、体重、HOMA-IR 、血脂。高脂喂养8 周后每4 周检测一次。第 12 周复测空腹血糖、空腹胰岛素、体重、HOMA-IR 、 血脂。部分大鼠行OGTT、IRT、ITT 评估胰岛素抵抗。处死部分大鼠（C 组5 只，HF 组6 只，共11 只），称量腹内脂肪重量，计算体脂比。 结果： 一 各组生化指标比较 0 周时两组体重、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR 、甘油三酯、 胆固醇差异无统计学意义。至 8 周时高脂组体重高于普食组，差异有统 计学意义（P0.05 ）12 周时除体重外，HOMA-IR 、胆固醇、甘油三酯两 组间也出现统计学差异（P0.05 ）。部分大鼠体脂比，高脂组高于普食组 （P0.05 ）。血糖、胰岛素两组间差异未出现统计学意义（P0.05 ）。 二 胰岛素抵抗评估： 口服糖耐量及胰岛素释放试验：高脂组AUC 、AUC 均较 （ ） （ ） OGTT IRT 普食组升高（P0.05 ），且糖负荷后60、120 分钟血糖，30、60 分钟胰岛 素也高于普食组（P0.05 ）。 胰岛素耐量试验：注射胰岛素后高脂组大鼠血糖下降缓慢，40 、90 分钟血糖高于普食组（P0.05 ）。曲线下面积增大（P0.05 ）。 三 HOMA-IR 相关性分析： spearman 相关分析显示：HOMA-IR 除与空腹血糖、胰岛素相关外尚 与体重（r=0.31462, P0.05 ）、甘油三酯相关（r=0.33643, P0.05 ）。 结论： 使用高脂饲料经过12 周喂养后诱导大鼠出现HOMA-IR 升高、糖耐 量下降、胰岛素敏感性下降。并伴有肥胖（尤其是中心性肥胖）及高甘 油三酯血症。成功建立了胰岛素抵抗动物模型。 第二部分：CD40L 在胰岛素抵抗大鼠中的表达 目的： 在胰岛素抵抗大鼠模型中观察 CD40L 的表达水平，并研究影响 CD40L 表达的相关因素。 方法： 健康SD 6 周龄大鼠60 只，按体重随机分为普食组（C ）、高脂组（HF ）。 C 组喂以基础饲料，HF 组喂以高脂饲料。第 12 周胰岛素抵抗动物模型 建立后。以ELISA 法测定循环sCD40L 浓度。处死部分大鼠（C 组5 只， HF 组6 只，共11 只），腹主动脉采血，以免疫沉淀、免疫印迹测定血小 板膜蛋白CD40