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MMP．2及TIMP．2在子宫颈上皮内瘤样病变进展中的作用 MMP．2及TIMP-2在子宫颈上皮内瘤样病变 进展中的作用 专 业：妇产科学 同等学力硕士：张天 峰 导 师：林仲秋教授 摘 要 富颈癌(cervicalcaneer，cc)的发生是一个连续的过程，是由宫颈上皮内瘤样病变 fcervical intraepithelialneoplasia，CIN)进展演变而来。探讨CIN进展的分了机制对宫 颈癌的预防和治疗都具有特别重要的意义。CIN是指宫颈癌前病变至原位癌的连续 过程，依据宫颈上皮细胞不典型增生的程度分为I、II、III级。肿瘤浸润和转移是 一个受多因素调节、多步骤的复杂过程：瘤细胞从原发灶脱离，穿过细胞外基质 fextracelluar membrane，BM)进入血液 matrix，ECM)屏障、血管壁基底膜(basement 循环，最后穿出血管壁进入新宿丰微环境形成转移灶。瘤细胞可产牛和(或)诱导间 质细胞产生多种蛋白酶降解ECM、血管壁BM，促进浸润转移。基质金属蛋白酶 (mallix metallo 族，几乎能降解ECM中所有成分。基质金属蛋白酶-2(matrix 多种肿瘤的浸润转移及预后密切相关，其在宫颈癌发生、发展中的作用也逐步受到 inhibitorof 重视，但其临床意义尚不明确。基质金属蛋白酶的组织抑制物(tissue matrix MMP-2及T1MP-2在子宫颈上皮内瘤样病变进展中的作用 性，也具有诱导细胞凋亡、促进血管生成等作用。TIMP-2是MMP-2的天然抑制剂， 与MMP-2形成1：l复合物，通过结合及抑制MMP-2活性来抑制肿瘤细胞的侵袭。 况，研究结果不完全一致，因而有必要进一步探讨。本研究采用CIN诊断明确的病 况。 研究目的 讨其在CIN进展中的作用。 材料与方法 1．标本来源 行放化疗，资料完整，且经病理证实。全部标本经10％福尔马林固定，石蜡包埋。 患者术前HPV(HC-2检测)均为阳性。 2．实验分组 组14例。 3．实验试剂 均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 Ⅱ MMP-2及TIMP．2在子宫颈上皮内瘤样病变进展中的作用 4．免疫组化检测 采用S-P法染色，切片常规脱蜡水化后。加入过氧化物酶阻断溶液阻断内源性 过氧化物酶的活性，抗原修复后加入第一抗体，4C冰箱过夜后，加入生物素标记的 第二抗体，室温下孵育后再加入链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶溶液，DAB显色， 苏木素复染，脱水、透明、封片。空白对照用PBS代替一抗，阳性对照采用绒毛组 织。 S．结果判断 免疫组化染色结果按照盲法由一位有经验的病理医师独立进行判断。光学显微 镜下观察并摄片，见细胞浆中出现明确的棕黄色颗粒的细胞为阳性信号。阳性信号 5．0图像分析系统进行定量分析，MMP-2和TIMP-2免疫反应产 采用Image-pro．plus 物的标记用光密度(A)表示，在镜下随机选取5个视野，每个{!!I!野系统自动随机 测定3个不同的部位，提取阳性细胞，测定MMP-2和TIMP．2的A值。 6．统计分析 数据采用SPSSl0．0统计软件处理，实验数据符合正态分布者用均数±标准差表 示，正态数据多组问比较采用单因素方差分析，两组间比较采用最小显著差异法 (LSD，Least significant 秩和检验，采用pearson进行相关分析，取PO．05为检验标准。 实验结果 1．MMP-