sirna抑制nf139对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………5 英文缩写………………………………………………………………………9 研究论文siRNA抑制ZNFl39对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及机 制研究 前言…………………………………………………………………………………………1月【f舌………………………………………………………………………………………… 00 1 材料与方法…………………………………………………………一1 结果…………………………………………………………………………………………18 附图…………………………………………………………………··21 附表…………………………………………………………………………………………26 讨论…………………………………………………………………………………………29 结j沧…………………………………………………………………………………………36 参考文献………………………………………………………………36 综述RNAi在消化系统肿瘤研究中的应用与进展……………………41 致谢……………………………………………………………………………53 个人简历…………………………………………………………………”54 中文摘要 摘 要 目的：胃癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤，目前对胃癌的治疗措施 是以手术为主导的综合治疗。但由于胃癌细胞具有较强的增殖及抗凋亡能 力且进展迅速，故目前对胃癌的治疗结果还远不能令人满意。因此，寻找 影响胃癌细胞增殖、凋亡的新基因有重要意义。锌指蛋白(zinc finger 很多成员与恶性肿瘤的增殖、凋亡有关。锌指蛋白139(zinc finger protein 调节胃癌增殖凋亡未见报道。RNA干扰(RNA 通过抑制显性突变致癌基因的表达、扩增、易位而成为从反面研究目的基 力，绘制转染胃癌细胞的时间．剂量曲线；流式细胞术(FCM)的方法检 测细胞凋亡率及细胞周期变化；逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)方法检 测ZNFl39、Cyclin 况，从而探讨其在胃癌增殖、凋亡调控中发挥的作用及机制。 方法：以人胃癌细胞株SGC7901为研究对象，人工合成质粒介导的 绘制胃癌细胞的时间．剂量曲线，以得到siRNA干扰的最适时间和剂量。 胞术分别测定3组细胞不同时间的凋亡率及细胞周期变化。最后分别提取 D1、PCNA、 Caspase．3、Bcl一2 方差分析、Spearman相关等分析其表达。 结果： 中文摘要 1三组凋亡率及细胞周期变化 1．1各组凋亡情况比较 SGC7901 组未见凋亡峰出现。经统计学分析，实验组3个不同处理时间凋亡率有统 计学差异(P=-O．001)，空白对照组和阴性对照组凋亡率无统计学差异 P=0．008)。 P=0．012，48h：卢．7．505P=0．016，72h：产．9．425 (24h：t8．826 1．2各组细胞的细胞周期分布比较 在处理24小时，三组细胞的细胞周期变化无统计学差异(庐O．388， P=-0．867)。 (25．767+0．85