人ifnγ对鼻癌模型的抗肿瘤作用与机制研究.pdf

吴江雪 中山大学博士后出站报告 人IFNY对鼻咽癌模型的抗肿瘤作用与机制研究 吴江雪 导师：黄文林教授 专业：肿瘤学 摘要 鼻咽癌是东南亚和地中海地区常见的头颈部恶性肿瘤，患者主要为中青年。 鼻咽癌的首选疗法为放射治疗，即使结合顺铂化疗，患者的5年生存率也仅为 70％。因此，迄需研发新的治疗方法。 本课题对重组IFNY蛋白对鼻咽癌的抗肿瘤作用及其机制进行了研究。结果 表明，鼻咽癌细胞株CNE一1、CNE-2与C666一l均表达有活性的IFNy受体及其下 Y可激活3株鼻咽癌细胞中 游效应因子(Jak一1、Jak-2、Stat-1与IRF-1)。IFN Y的 的Jak—Stat信号通路，并以剂量与时间依赖性的方式抑制细胞的生长。IFN 抗增殖作用与GO／G1期阻滞和细胞凋亡相关。IFNY诱导的GO／G1期阻滞与周期 的下调有关。而IFN x106 IU／Kg／d的剂量 家族分子(caspase一1、一3、-8、一9)激活的参与。以2 瘤内注射IFNY，连续给药21天，可显著提高CNE一2、C666—1移植瘤小鼠的生 Y可通过 存率(尸o．05)，抑瘤率分别达到47．8％和50％。这些结果表明，IFN II 吴江雩 中山大学博卜后出站报告 诱导GO／G1期阻滞和细胞凋亡直接抑制鼻咽癌细胞的增殖，并抑制鼻咽癌移植瘤 的生长，因此，IFNY治疗有望成为鼻咽癌治疗的新疗法。 重组IFNy蛋白的l}缶床应用受到其半衰期短及毒副作用的限制，因此，我们 构建了携带IFNy基因的重组小环载体(minicirele—IFNY)，研究IFNy基因治 疗在鼻咽癌治疗中的应用。将minicircle—IFNY及携带相同表达盒的母质粒 p2巾C31一IFN 余导的外源基因表达较p2mC31高19至102倍，而且可更有效的抑制CNE—l、 CNE一2与C666-1的生长，将细胞的相对生长率分别降低至7．1％±1．6％、 Y基 2．7％±1．0％与6．1％4-1．6％。流式细胞检测和caspase一3活性分析表明，IFN 因治疗可通过诱导细胞G0／G1期阻滞和凋亡直接抑制鼻咽癌细胞的增殖。在 Y 高11至14倍，且表达可持续达21天。与p2中C31一IFNY处理组小鼠相比，小 环载体处理组小鼠的生存率显著提高(尸0．05)，抑瘤率分别达到77．5％和83％。 我们的研究表明，IFNY基因治疗可在体外直接抑制鼻咽癌细胞的增殖，并在体 内抑制移植瘤的生长。与相应的常规质粒相比，minicircle—IFNy可介导外源 基因长期、高效表达。因此，小环载体介导的IFNY基因治疗在鼻咽癌的治疗中 有广阔的应用前景。 关键词：干扰素Y；鼻咽癌；抗肿瘤：小环载体；基因治疗 111 吴江雩 中山大学博Ij后f{I站报告 IFN丫Induces andAnti—tumoralEffects Anti—proliferative