人粪便dna中if-1基因甲基化的分析及对结直肠癌的诊断作用.pdf

罨 《 lIllll 1 II IIII111111IIl Y1779493 目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………3 研究论文人粪便DNA中WIF-1基因甲基化的分析对结直肠癌的诊 断作用 前言……………………………………………………………………．6日lJ舌……………………………………………………………………． 材料与方法………………………………………………………………．7 结果……………………．．………………………………………………12 附图……………………………………………………………………．．14 附表……………………………………………………………………17 讨论………………—…………………………………………………22 结论…………………………………………………………………．．28 参考文献………………………………………………………………．28 综述Wnt拮抗物WIF．1的甲基化在肿瘤中的研究………………………．32 致 谢………………………………………………………………………41 个人简历…………………………………………………………………．．42 中文摘要 人粪便DN^中WlF-1基因甲基化的分析及对结直肠癌 的诊断作用 摘 要 目的：结直肠癌(CRC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一。在消化道 肿瘤发病率位居第三，部分地区已上升至第二位。随着我国人民生活水平 的提高，饮食结构的改变，近年来我国的CRC每年发病增速已为世界平均 数的两倍。虽然手术前后的放化疗等治疗方法已对CRC的治疗产生了积极 的效果，但中晚期CRC的5年的生存率仍然不算乐观。日益严峻的诊治任 务需要医务工作者能在CRC早期就能够明确诊断和治疗。所以为了应对 CRC的延误诊治我们需要一个行之有效的早期筛查方法，以便于早期使得 CRC得到根治效果。目前对于CRC的诊查方法包括结直肠镜及粪便隐血实 验等手段，但是都不能同时具备依从性好，无创，敏感及特异性高等特点， 这样就使得我们的早期诊断工作难以进行。有数据显示只有大概10％-15％ 的CRC患者得到了早期诊治。为了以提高五年甚至十年生存率，我们急需 寻找一种具备无创，方便灵敏早期诊断的新方法。在粪便中检测与肿瘤相 关DNA的改变为早期诊断CRC提供了新思路。作为对肿瘤发生机制的重要 补充，表观遗传学改变是较遗传学改变更为常见的基因表达调控机制。对 于检测粪便中基因启动子甲基化相较于检测基因突变效果更为理想。 frizzled．related 与分泌型卷曲蛋白相关家族(secreted proteinfamily, 的阻断Wnt信号的传导。WIF．1转录失活与其启动子过度甲基化频率增 高密切相关，并且与Wnt通路的异常导致的CRC关系密切。我们推测 WIF．1启动子区的甲基化检测可作为粪便DNA筛查的标志，遂检测结直 肠癌及结直肠良性病变的病人的粪便中WIF．1的启动子的甲基化情况并 结合临床病理资料进行分析，评价其对癌及癌前病变早期诊断的作用并同 时总结从粪便提取DNA到最后进行PCR的结果及经验。 方法： 中文摘要 院的结直肠癌病人以及在内镜室检查肠道息肉病人和正常人的粪便标本， 共62例，记录最终病理结果 2使用粪便细胞DNA提取试剂盒提取粪便DNA确定符合标准的 DNA后记录资料并在验证人基因组DNA存在后使用甲基化特异性 PCR(MS．PCR)检测粪便DNA中WIF．1基因启动子甲基化情况。