戊四氮点燃癫痫鼠海马p53的表达变化.pdf

中文摘要 戊四氮点燃癫痫大鼠海马p53的表达变化 摘 要 目的：癫痫是以脑部神经元过度放电所致的突然反复发 作和暂时性的中枢神经系统功能失常为特征的一种常见的 临床综合征。癫痫发作后脑组织内各种酶、神经递质、氨基 酸等化学物质水平迅速变化，可致脑损伤，并与凋亡相关基 因共同作用促使神经细胞凋亡，但目前对癫痫后细胞凋亡的 分子机制尚不清楚。p53基因是一种重要的抑癌基因，近年 来发现，p53基因与细胞凋亡有密切关系。本研究通过腹腔 鼠模型(status Blot方法来检测癫痫 录多聚酶链反应(RT．PCR)以及Western 发作大鼠脑海马神经细胞不同时间的p53表达变化，探讨凋 亡相关基因P53在癫痫发病中的调控机制，为进一步研究癫 痫发病后的凋亡机制奠定基础。 境温度，分笼喂养。随机分为癫痫持续状态组(status control 小时五个亚组，每组20只，正常对照组(normal group， 无任何反应；I级：胡须动、面肌抽动；II级：点头、咀嚼 中文摘要 或湿狗样抖动(wet dog 阵挛；Ⅳ级：站立伴有双侧前肢阵挛；V级：跌倒、全身强 直阵挛性发作，SE大鼠模型成功标准：运动惊厥达Ⅳ级或以 上为诱发成功，且反复发作达30min以上。NC组大鼠在相 同时间给予同等容量、同等次数的生理盐水。行为学观察后， 法和Westem mRNA和蛋白 Blot方法分别测定大鼠海马p53 的水平变化，免疫组织化学方法观察p53在海马CAl区、CA3 区的表达情况。 结果：1行为学观察 SE组大鼠共1oo只，其中16只 腹腔注射PTZ 动、尾巴翘起，继而节律性缩头、双侧前肢抬起、肌阵挛， 随着PTZ每10min注射一次，最终发展为全身强直．阵挛性 发作，四肢强烈抽搐，伴有跌倒、翻滚及流涎，达到RacineIV～ V级的点燃标准，每次发作数分钟不等，且反复发作，持续 在30min以上，达到癫痫持续状态标准。其中有34只大鼠 因发作抽搐过强、时间持续长而死亡，死亡率为34％，NC 组大鼠均未出现癫痫发作。 2大鼠海马组织p53 对照组。 注射戊四氮大鼠出现 3大鼠海马组织p53蛋白的表达 中文摘要 mRNA相吻合。 p53 4p53蛋白免疫组化表达的结果注射戊四氮大鼠出现 海马CAl、CA3区均可见明显表达。p53蛋白阳性细胞主要 分布在海马锥体细胞核，呈棕褐色。在NC组大鼠海马锥体 细胞核未见明显p53蛋白免疫反应阳性细胞。 结论：1腹腔注射戊四氮可成功诱导大鼠癫痫持续状态 模型，是模拟全身强直一阵挛性癫痫发作的一种理想模型。 2戊四氮诱导癫痫持续状态后，大鼠海马p53mRNA及 其蛋白的表达于6h开始增高，24h达高峰，随后逐渐下降， 表明p53基因及其编码蛋白可能是戊四氮致痫后海马神经元 凋亡的重要效应因子。 关键词：戊四氮；癫痫；凋亡；海马；p53 ． 薹查塑墨 ．—— —————_——_———————————————_———————————————————————一 in of ofP53 hippocampus Changesexpression