血浆exosoes小体对treg细胞功能的影响及b细胞体外扩增treg细胞的初步研究.pdfVIP

复旦大学硕士研究生论文 中文摘要 目的： T 调节性T细胞(Regulatory 情况及其Wnt信号通路的变化。 2．通过将同种异基因人外周血B淋巴细胞体外扩增Treg细胞，观察Treg细胞扩增 前后在数量上的变化及表型和功能是否改变，建立体外扩增Treg细胞的有效方 法，并与树突细胞(dendriticcell，DC)扩增Treg细胞的方法相比较。 方法： 通路涉及的凋亡相关基因的改变，同时采用流式技术检测Wnt信号通路中磷酸化 B—catenin水平的改变，并在共培养14天后采用流式技术检测各组细胞的凋亡 情况。设立未经处理的Treg细胞组为对照组。 2．将异体健康供者外周血分离得到的B淋巴细胞与磁珠分选得到的Treg细胞共孵 中通过流式检测Treg细胞表型的变化，同时与树突状细胞扩增Treg细胞的方法 相比较(培养条件相同)。14天培养结束后，将细胞与CFSE处理过的经强刺激 (加入CD3单抗500ng／m1，IL-2 处理过的CD4+T细胞为对照组。 结果： 基因，通过Western 共培养时，抗凋亡基因Bcl-2相对于对照组均有明显的上调，另一抗凋亡基因 Bcl-xL和诱导凋亡的基因c-Myc无明显变化。培养14天后，通过流式检测凋亡， 加入Exosomes样小体或Wnt分子的Treg细胞生存率均比对照组高。 复旦大学硕士研究生论文 天后流式检测，扩增后的Treg细胞能够有效地抑制CD4+T细胞的增殖功能。 结 论 2．同种异基因B淋巴细胞能够在体外有效的扩增人外周血Treg细胞，扩增效率可达 20倍以上，并且能显著抑制CD4+T细胞的增殖。 淋巴细胞，体外扩增，增殖抑制 中图分类号：R392．12 2 复旦大学硕士研究生论文 Abstract 0bjective： of theeffecthuman exosomes-likevesiclesorrecombinantWnt 1．Through plasma moleculesonCD4-I-CD25-I-CDl27low T the regulatory survivalof cellsinvitro the oftheWnt Treg and changes signalingpathway． the of cells human bloodB 2．ThroughexpansionTreg byallogeneicperipheral in the of cellsinthenumbe vitro，observedchangesTreg r，phenotype lymphocytes afterthe aneffectiveofthe of andfunction way expansion expansion，established cellsinvitro，and withthe method dendritic Treg comparedexpansionbyregulatory cells(rDC)． Methods： 1．CD4+CD25+CDl2710w