门静脉栓塞及结联合hgf应用对肝纤维化肝再生的研究.pdf

＼r ‘I．o●￡ ● ¨o■k ，．o ，■l 中文摘要 肿IllllIJFIrllJlIJIIIIiPIxrJIrrIlJlll Jrlll Y1801870 门静脉栓塞及结扎联合HGF应用对肝纤维化肝再生的研究 摘 要 目的：本研究通过选择性栓塞和结扎肝纤维化大鼠门静脉，并给予外 factor，HGF)，观察对侧肝脏再 源性肝细胞生长因子(hepatocytegrowth 生的指标，旨在探讨肝纤维化大鼠选择性门静脉栓塞及结扎后对侧肝脏再 生的能力，比较两者之间肝再生的差异；分析给予外源性HGF对肝纤维 化大鼠门静脉栓塞及结扎后肝再生的影响；探讨肝纤维化大鼠门静脉栓塞 及结扎的安全性，为进一步的I临床应用奠定基础。 方法：健康成年雄性Wistar大鼠45只，随机取5只作为术前对照， 余40只随机分为2组：正常大鼠门静脉栓塞组(A1，n=20)及正常大鼠 门静脉结扎组(A2，n-20)；肝纤维化大鼠85只，随机取5只作为术前 对照，余80只随机分为4组：肝纤维化门静脉栓塞组(B1，n=20)、肝 或结扎供应左外叶、左中叶和中叶的门静脉左支。每小组于术后1天、3 天、7天及14天分批处死大鼠(n-5)，5只正常大鼠及5只纤维化大鼠于 术前处死。于术前及术后各观察时间点取外周血检测血清中丙氨酸氨基转 移酶(alanine 分别称取各叶肝脏重量及全肝的重量，换算为肝重g／lOOg体重，并计算 术后不同时间的非栓塞叶及非结扎叶在整个肝脏中所占的百分比；分别取 大鼠栓塞、结扎侧肝叶及非栓塞、非结扎侧肝叶，10％甲醛固定，常规石 蜡包埋切片，HE染色，观察肝脏显微结构的改变；行免疫组织化学检查， 检测增殖细胞核抗原(PCNA)及戤．67的表达。以上结果分别做统计学 处理。 结果： 1、肝功能变化：术后各组ALT、AST呈一过性升高改变，表现为门 第 静脉栓塞及结扎术后第1天较术前明显升高(正O．05)，并达到高峰， 中文摘要 组术后舢玎及AST峰值较正常大鼠组高(pO．05)，较肝纤维化组低 AST水平无显著性差异(矿O．05)。 2、术后不同时间大鼠非栓塞叶肝重／全肝重百分比、非结扎叶肝重／ 全肝重百分比及全肝重(g／1009体重)变化：各组大鼠非栓塞及非结扎 侧肝重／全肝重百分比均随时间增加，术后1天与术前相比无显著差异(p 肝纤维化大鼠非栓塞及非结扎侧肝重增长缓慢：术后14天，肝纤维化 +HG，F组非栓塞叶肝重／全肝重、非结扎叶肝重／全肝重比值较正常大鼠组 C2组间各时间点非栓塞叶肝重／全肝重、非结扎叶肝重／全肝重比值及全肝 重)术后1d、3d略低于术前水平，以后逐渐恢复至术前水平，与术前相 比差异无显著性(矿0．05)。 3、免疫组织化学改变：在正常大鼠肝组织中，PCNA术前仅有少量 表达，术后第l天非栓塞及非结扎侧肝叶PCNA的表达较术前显著增加 (卿．05)，并达到高峰，以后逐渐下降，术后14d恢复至正常水平，A1 表达较术前明显增加并于第3d达高峰(萨0．05)，然后缓慢下降，14d恢 纤维化+H(求组术后非栓塞及非结扎侧肝叶PCNA的表达较术前明显增 (po．05)。 在正常组的肝组织中，瞄．67术前几乎不表达，术后第1天非栓塞及 非结扎侧肝叶的Ⅺ．67的表达较术前显著增加(少，0．05)，并达到高峰， 的表达无显著性差异(p》0．05)；肝纤维化组术前肝组织瞄一67的表达较 正常组增多(p0．05)，术后非栓塞及非结扎侧肝叶的表达较术前明显增 中文摘要 加并于第3d达高峰(正0．05)，然后缓慢下降，14d