山羊痘病毒基因缺失重组毒株构建和生物学特性鉴定.pdfVIP

山羊痘病毒基因缺失重组毒株的构建与生物学特性鉴定 摘要 山羊痘是一种急热性传染病，由山羊痘病毒(goa印oxvirus，G，rPV) 引发，临床上以出现发热和全身起痘为典型特征，具有很高的发病率 和死亡率。我国目前使用山羊痘弱毒疫苗AV41株来预防山羊痘，但 ’ 其在我国部分省份尤其是南方部分地区的羊痘防疫过程中，发现存在 有安全隐患，可产生诸多不良反应，如全身发痘、孕羊流产等。因此， 有必要进一步研制更为安全有效的新型基因工程疫苗。 本研究利用分子生物学、病毒学和免疫学等方面的技术和手段， 以G1PV弱毒疫苗毒株AV41为模板，分别设计4对引物，PCR扩增 … 段，分别作为同源重组左侧臂和右侧臂；运用分子技术，分别将两侧 重组臂相连，并在两个重组臂中间插入报告基因EGFP和筛选基因 gpt的表达盒，构建转移载体质粒pLF．Eg和pI江．Eg；分别将转移载 A¨1株共转染非洲绿猴肾细胞 体质粒pLF-Eg和pRF—Eg与GrPV (Vero细胞)，使其在细胞内发生同源重