一种新硫色满酮衍生物诱导人乳腺癌MCF-7 细胞凋亡.pdfVIP

2012 年 第 57 卷 第 8 期：626 ~ 633 《中国科学》杂志社 论 文 SCIENCE CHINA PRESS 一种新硫色满酮衍生物诱导人乳腺癌MCF-7 细胞凋亡 ① ①②③* ① ① ①③ ①②* 黄鑫 , 刘玉欣 , 苏立敏 , 郝德忠 , 崔世怡 , 杨更亮 ① 河北大学药学院, 保定 071002; ② 河北省药物质量分析控制重点实验室, 保定 071002; ③ 河北大学药物化学与分子诊断省部共建教育部重点实验室, 保定 071002 * 联系人, E-mail: yuxinliu@; ygl@ 2011-08-23 收稿, 2011-09-30 接受 河北大学研究基金(y2008118)、河北省高等学校科学技术研究重点项目(ZD2010234)和河北省应用基础研究计划重点基础研究项目) 资助 摘要 初步研究了新合成的( 顺)-3-( 氯代亚甲基)-5- 甲基-硫色满-4- 酮(3-chloromethylene-5- 关键词 fluoro-thiochroman-4-one, CMTK)对人乳腺癌 MCF-7 细胞增殖和凋亡的影响, 分别用不同浓 ( 顺)-3-( 氯代亚甲 度的CMTK 对细胞进行干预, 采用改良的MTT 法测定CMTK 抑制细胞增殖的能力, 台盼蓝 基)-5- 甲基- 硫 染色法计数活细胞数, 绘制生长曲线, 流式细胞术检测细胞对细胞周期的影响, 同时采用流 色满-4-酮 凋亡 式细胞术及TUNEL 染色法(terminal dexynucleotidyl transferase (TdT)-mediated dUTP nick end TNFR1 labelling)检测CMTK 诱导凋亡, 活性检测法测定细胞中人半胱氨酸蛋白酶8 (caspase-8)和人 caspase-8 半胱氨酸蛋白酶9 (caspase-9) 的活性, ELISA 法测人死亡受体3 (death receptor 3, DR3)、人肿 caspase-9 caspase-3 瘤坏死因子受体1 (tumor necrosis factor receptor 1, TNFR1)、人肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)、人半胱氨酸蛋白酶3 (caspase-3) 的蛋白表达情况. 结果表明, CMTK 可明显 抑制 MCF-7 细胞增殖, 与顺铂(cisplatin, CDDP)相比, 其抗肿瘤活性更明显, IC50 为 14.24 ± 0.12 mol L1; 生长曲线进一步说明 CMTK 抑制细胞增殖, 其抑制作用呈时间-剂量依赖性; 流式细胞仪检测分析显示, 加药12 和24 h 后可将细胞阻滞于G0/G1 期(**P 0.05); TUNEL 法 和流式细胞仪分析CMTK 可诱导凋亡的结果基本一致; 与药物作用后, caspase-8 和caspase-9 的活性增高, 并呈浓度剂量依赖性; ELISA 法检测DR3 蛋白量和TNF-细胞因子的量无变化, TNFR1 和caspase-3 的蛋白量显著增高, CMTK 诱导肿瘤细胞凋亡的机制可能是: 不仅可以通 过死亡受体 TNFR1 介导凋亡途径, 激活 caspase-8; 还可以通过线粒体凋亡途径,