精品 2013届高三生物 专题十六 基因工程细胞工程植物组培复习课件沪科版.pptVIP

【Ks5u原创】2013届高三生物复习课件 专题十六 基因工程和细胞工程 　　　　　　一　基因工程 (3)将目的基因 导入受体细胞 (1) 目的基因的获取 ? ? í ? ì ① 从基因文库中获取 ② 利用 PCR 技术扩增 ③ 用化学方法直接人工合成 (2) 基因表达载体的构建 ( 目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 ) ? ? ? í ? ? ì 导入植物 ? ? í ? ì 农杆菌转化法 基因枪法、花粉管通道法 导入动物：显微注射法 导入微生物：感受态细胞法 ( 用 Ca 2 ＋ 处理 ) 个体水平检测 (4)目的基因的 检测与鉴定 注意比较　①DNA连接酶：连接两个DNA片段， 　　　　　　DNA聚合酶：只能将单个脱氧核苷酸　　　　　　　　　　　　　添加到脱氧核苷酸链上。 　　　　　②限制酶的特点： DNA具某种特定的脱　　　　　　　　　　　　　氧核苷酸识别序列，并具有特定的切割位点。 　　　　　　解旋酶：DNA的两条链间的氢键打开形成两条单链。 启动子、目的基因、终止子、标记基因、复制原点 有一个至多个限制酶切割位点、能自我复制或整合到染色体上随之复制、标记基因（供重组ＤＮＡ的鉴定和选择） 磷酸二酯 肽　 专一性 限制酶 启动子 磷酸二酯 肽　 专一性 限制酶 启动子 ＡＣＤ 选修3专题二　克隆技术(细胞工程) 一、植物细胞组织培养 二、动物细胞培养 三、植物体细胞杂交 四、动物细胞融合 五、单克隆抗体的制备 克隆化培养 单抗制备中的关键步骤 二倍体幼苗 增殖与分化 ①④ 4　 例4　运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现：用人体细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体。杂种细胞在持续分裂过程中仅保留小鼠的染色体而人的染色体则逐渐丢失，最后只剩一条或几条染色体。如图是人的缺乏HGPRT酶的突变细胞株(HGPRT－)和小鼠的缺乏TK酶的细胞株(TK－)融合后在HAT培养液中培养的过程，结果表明，最终人的染色体在融合细胞中仅存有3号染色体或17号染色体或两者都有。已知只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖。 远缘杂交不亲和(或生殖隔离)　 用灭活的(仙台)病毒诱导融合　 抗生素　 胰蛋白酶 选择(筛选) TK酶　 17 例5.质粒是常用的基因工程载体。如图是某种天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(标示了部分基因及部分限制酶作用位点)，据图分析下列说法正确的是( ) A．图中的终止子是由三个相邻碱基组成的终止密码 B．用农杆菌转化法可将该质粒构建的表达载体导入动物细胞 C．用限制酶Ⅰ和DNA连接酶改造后的质粒无法被限制酶Ⅱ切割 D．用限制酶Ⅱ处理能防止该质粒构建的表达载体引起植物疯长 D AD 例6.(2012·江苏卷，22)下列事实能体现细胞全能性的是 (　　) A．棉花根尖细胞经诱导形成幼苗 B．单细胞的DNA在体外大量扩增 C．动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体 D．小鼠体细胞经诱导培育成小鼠 A C * * 2. 基本工具 限制酶 DNA连接酶 载体 作用 切割目的基因和载体 拼接DNA片段，形成重组DNA 携带目的基因进入受体细胞作用 部位 两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键 应用举例——基因诊断与基因治疗 (1)基因诊断：DNA分子杂交法(即DNA探针法)，该方法是根据碱基互补配对原则，把互补的双链DNA解开，把单链的DNA小片段用同位素、荧光分子或化学发光催化剂等进行标记，之后与被检测的DNA中的同源互补序列杂交，从而检出所要查明的DNA或基因。 (2)基因治疗的方法：基因置换、基因修复、基因增补、基因失活等。 (3)基因治疗的途径 ①体外基因治疗：先从病人体内获得某种细胞进行培养，然后在体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内。如腺苷酸脱氨酶基因的转移。 ②体内基因治疗：用基因工程的方法，直接向人体组织细胞中转移基因的治疗方法。 1．容易混淆的三种细胞——杂种细胞、重组细胞和杂交细胞 (1)杂种细胞：植物体细胞杂交过程中，两种细胞去掉细胞壁之后形成的原生质体融合，融合的原生质体出现细胞壁之后形成的细胞叫杂种细胞。 (2)重组细胞：体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞之后形成的细胞叫重组细胞。 (3)杂交细胞：动物细胞融合形成的细胞常称为杂交细胞。 解析　这两种酶切割DNA分子后再连接时，会出现自身连接和相互连接两种情况，其中自身连接的片段可以被再次切割，而相互连接的片段不能被切割，因此相互连接的片段会越来越多。 3．受体细胞种类的确定 受体种类不同，所用的受体细胞种类也不相同。 (1)植物：由于植物细胞有全能性，植物体细胞经过植物组织培养能够形成生物体，所以植物的受