吉非替尼肺靶向包合物脂质体的制备和评价.pdfVIP

摘 要 目的： 生长因子(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂，可以降低酪氨酸激酶活性，阻断EGFR参与 的肿瘤细胞间信息传递，从而抑制肿瘤细胞的生存、繁殖以及转移，以起到抗肿瘤的 作用。目前己上市的吉非替尼制剂为片剂，且存在口服吸收缓慢、体内分布广泛、胃 肠道不良反应程度随给药剂量增加而加重的问题。脂质体(1iposome)作为一种新型 药物载体，由于其良好的生物兼容性与可修饰潜力，逐渐成为抗肿瘤药物制剂研究领 域的热点。 本实验采用薄膜分散一冻融法制备吉非替尼肺靶向包合物脂质体，采用羟丙基．p． 稳定性，并在制剂处方中加入D．甘露糖与十八胺，使药物呈现肺部靶向性作用，降低 给药剂量，减少不良反应产生概率，提升药物靶向于肺部肿瘤的治疗指数。 方法： 在查阅相关文献的基础上，本实验首先建立了脂质体混悬液中、大鼠血浆内以及 小鼠组织中吉非替尼高效液相色谱法检测方法，并对该色谱条件进行了方法学考察。 结合相关文献及预实验结果，初步确定吉非替尼肺靶向包合物脂质体的制备处方 及工艺，以包封率为主要评价指标对吉非替尼肺靶向包合物脂质体主要制备处方及工 艺因素进行考察，探讨了对包封率影响较大的处方因素及最佳制备工艺。在单因素实 验考察的基础上，选择7个影响因素进行了正交实验，并进行极差分析，从而得出最 终制备方法。 对已制备的吉非替尼肺靶向包合物脂质体进行初步的稳定性考察及质量评价。稳 定性考察主要包括制剂贮存温度和渗漏率的考察。质量评价主要包括对脂质体的外 观、pH值、形态结构、粒径分布、表面电位、包封率以及体外释放度的考察。 以吉非替尼溶液作为对照品，对吉非替尼肺靶向包合物脂质体进行大鼠体内药物 动力学、小鼠体内组织分布研究。在大鼠体内药物动力学研究中，以吉非替尼溶液为 对照制剂，以吉非替尼肺靶向包合物脂质体为实验制剂，以SD大鼠为受试动物，采 用尾静脉注射给药的方法测定血药浓度并计算药物动力学参数。在小鼠体内组织分布 研究中，以吉非替尼溶液为对照制剂，以吉非替尼肺靶向包合物脂质体为实验制剂， 以小鼠为受试动物，进行组织分布实验，得出药物在小鼠体内的组织分布情况。 结果： 建立了脂质体混悬液中、大鼠血浆内以及小鼠组织中吉非替尼高效液相色谱法检 测方法，并对该色谱条件进行了方法学考察。结果表明，吉非替尼专属性良好，线性 HC—C18 关系、精密度及回收率等指标均符合实验要求。色谱条件如下，色谱柱：Agilent mmol·L_乙酸铵 柱(4．6×150舢1】，5uIll)；保护柱：通用型保护柱；流动相：甲醇一10 水溶液(体积比70：30)；流速：1．0 hi／1， mL·min一；进样量20“L；检测波长：330 柱温：25℃。 以脂质体包封率为检测指标，通过单因素考察与正交实验，最终选择的制备方法 为薄膜分散．冻融法。得到吉非替尼肺靶向包合物脂质体的最佳制备方法如下：主要载 20；十 体材料为大豆卵磷脂和胆固醇，添加比例为3：l；吉非替尼：大豆卵磷脂为1 八胺：大豆卵磷脂为1：15；制备温度为35℃，水化介质为100mg·mL。1的羟丙基-13． 环糊精，并向其中加入1．5 mg·mLl的D．甘露糖，水化温度为25℃；重复冻融3次后 置于4℃贮存。 制得的吉非替尼肺靶向包合物脂质体混悬液呈淡黄色，pH值为6．5，粒径为320．4 nm，粒径分布较为集中，表面电位为+34．29mV，包封率为51．02％，稳定性良好， 能够在4℃下稳定保存，混悬液均一稳定，30天内未出现沉淀现象，在含30％甲醇 的磷酸盐缓冲溶液释放介质中脂质体混悬液释放速率小于吉非替尼溶液。 在大鼠体内药物动力学研究中，吉非替尼肺靶向包合物脂质体的AUC值为8．384 mL～，MRT值为8．410 h。 ／ag—h