基于原球茎液体培养的白芨快速繁殖研究.pdfVIP

江苏农业科学　２０１５年第４３卷第１０期 — ５９— 张宇思，姚正颖，刘金香，等．基于原球茎液体培养的白芨快速繁殖研究［Ｊ］．江苏农业科学，２０１５，４３（１０）：５９－６２，３３１． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１５．１０．０１８ 基于原球茎液体培养的白芨快速繁殖研究 １ ２ １ ２ １ ２ 张宇思 ，姚正颖 ，刘金香 ，张卫明 ，丁小余 ，孙力军 （１．南京师范大学生命科学学院，江苏南京２１００２３；２．南京野生植物综合利用研究院，江苏南京２１００４２） 　　摘要：为了建立高效的白芨快繁技术体系，研究了白芨种子萌发和原球茎生长的液体培养条件，比较了全程固体 ７ 培养基培养（ＱＧ）与液体固体培养基分段培养（ＹＧ）这２种培养方式的优劣。首先通过Ｌ （３）正交试验，筛选了适 １８ 宜种子萌发及原球茎生长的液体培养条件。结果表明，添加剂种类、大量元素、６－ＢＡ浓度、ＮＡＡ浓度对白芨种子萌 发及原球茎诱导影响最大。统计分析结果表明，最佳培养条件为１／４ＭＳ＋１ｍｇ／ＬＮＡＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋１００ｇ／Ｌ 马铃薯汁＋３０ｇ／Ｌ蔗糖，ｐＨ值５．８，培养温度为２２℃，摇床转数为１００ｒ／ｍｉｎ，每天光照时间为８ｈ。另外，源于ＹＧ的 白芨苗在移栽成活率、叶片颜色、叶片长度、苗高几个方面均优于源于ＱＧ的白芨苗，且差异显著。本研究创建的液体 固体培养基分段培养体系将有助于保护与可持续利用白芨野生资源。 　　关键词：白芨；快速繁殖；分段培养；全程固体培养基；液体固体培养基 ＋ 　　中图分类号：Ｓ５６７．２３９．０４３　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１５）１０－００５９－０４ 　　白芨［Ｂｌｅｔｉｌｌａｓｔｒｉａｔａ（Ｔｈｕｎｂ．）Ｒｅｉｃｈｂ．ｆ．］为兰科白芨属 内部种子呈分散状。 多年生草本植物，以块茎供药用，其种子极小，结构简单且无 １．２　白芨快繁操作方法 ［１］ 胚乳，自然繁殖率极低 。近年来，白芨的应用范围逐步扩 试验过程包括白芨种子的灭菌、原球茎诱导培养、增殖培 大，加上市场需求的快速增长，野生资源遭到过度采挖，已濒 养、壮苗培养、生根培养５个步骤，具体方法如下： ［２］ 临灭绝，现已被列为国家重点保护野生植物 。为了保护白 １．２．１　灭菌　对于未开裂果荚，在超净台中用７５％乙醇将 芨野生资源，实现白芨的人工种植，逐渐有一些关于白芨组培 白芨蒴果消毒３０ｓ，再用０．１％ＨｇＣｌ水溶液浸泡２５ｍｉｎ，无 ２ 快繁的研究，这些研究为白芨野生资源的保护与利用提供了 菌水冲洗５次，然后置于干燥的灭菌滤纸上吸尽水分，用解剖 参考。目前，虽然白芨组织培养和设施栽培等人工繁育关键 刀切开蒴果，取出种子；对于开裂果荚，在超净台中，将种子取 技术得到了一定的发展，但是依然面临着种苗培养周期长、成 出，置于两通玻璃管中，玻璃管一端用纱布和脱脂棉封口，并用 本高等问题。为了最大限度地缩短白芨快繁的时间，降低成 ７５％乙醇和１％次氯酸钠溶液各消毒３０ｓ和１５ｍｉｎ，再用灭菌 本，提高白芨种苗的质量，仍需探索更好的白芨快繁条件。 水灌洗３ｍｉｎ，最后剪开纱布，收集灭菌的种子。为了避免种子 目前白芨的常规快繁方法大多以固体培养基为主，即将 因蒴果来源不一致造成较大误差，２种方式收集的灭菌种子合 白芨种子播于固体培养基上，经过原球