多抗菌素发酵培养基响应面优化.pdfVIP

— １５４— 江苏农业科学　２０１５年第４３卷第１０期 杨　洋，胡永红，杨文革，等．多抗菌素发酵培养基响应面优化［Ｊ］．江苏农业科学，２０１５，４３（１０）：１５４－１５８． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１５．１０．０４７ 多抗菌素发酵培养基响应面优化 杨　洋，胡永红，杨文革，曹　峥，张　棋 （南京工业大学材料化学工程国家重点实验室，江苏南京２１１８１６） 　　摘要：以多抗菌素生产菌ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓａｕｒｅｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓＮＪＹＨＷＧ６６３８２为试验菌株，在单因素试验的基础上进行 Ｐｌａｃｋｅｔｔ－Ｂｕｒｍａｎ试验和中心组合试验设计，采用响应面法建立发酵培养基的优化模型，得到最优产多抗菌素的培养 基：蔗糖１７．４２ｇ／Ｌ，酵母膏１８．７２ｇ／Ｌ，ＫＨＰＯ０．６９ｇ／Ｌ，ＦｅＳＯ０．２ｇ／Ｌ，ＣａＣＯ０．３ｇ／Ｌ。经试验验证，在此条件下，多 ２ ４ ４ ３ 抗菌素的效价可达２３００ ｇ／ｍＬ，比优化前提高了４０％。 μ 　　关键词：多抗菌素；培养基优化；响应面法；条件；效价 ＋ 　　中图分类号：Ｓ４８２．２８　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１５）１０－０１５４－０４ 　　目前，植物病害在全球范围内每年造成高达数千亿美元 １．３　主要试剂和仪器 的损失，而其中又以真菌病害最为严重。多抗菌素（ｐｏｌｙｏｘ 试验主要试剂：蔗糖、葡萄糖、甘油、可溶性淀粉、蛋白胨、 ｉｎｓ）也被称为多效霉素，多抗霉素，多氧霉素，是一种抗真菌 酵母膏、琼脂粉（国药集团化学试剂有限公司），ＦｅＳＯ · ４ 核苷类抗生素。多抗菌素能够抑制真菌细胞壁几丁质的合 ７ＨＯ、ＭｇＳＯ ·７ＨＯ、ＫＨＰＯ ·３ＨＯ、ＮａＮＯ、ＣｕＳＯ、ＣａＣＯ ２ ４ ２ ２ ４ ２ ３ ４ ３ 成，被广泛应用于治疗水稻纹枯病、梨黑斑病和番茄灰霉病等 （广东汕头市西陇化工厂）。 植物真菌病害，是一种有效防治植物真菌病害的生物农 试验仪器设备：电热恒温培养箱（上海跃进医疗器械 ［１－２］ 药 。多抗菌素作为一种广谱性抗生素，具有良好的内吸 厂）、灭菌锅（华粤行仪器有限公司）、医用净化工作台（苏州 性和高度的靶标生物选择性，已成为国内外杀菌、除虫的一线 净化设备厂）、鼓风电热恒温干燥箱（上海实验仪器厂有限公 ［３－４］ 药物之一 。然而，在多抗菌素发酵生产过程中，多抗菌素 司）、基础分析型纯水机（青岛富勒姆科技有限公司）。 效价低、生产成本高、发酵周期长等问题限制了其推广应 １．４　试验方法 ［５－７］ 用 。因此，对多抗菌素发酵培养基优化及条件初探具有 １．４．１　多抗菌素含量的测定　用管碟法测量发酵液中多抗 重大意义。本研究以多抗菌素生产菌Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓａｕｒｅｏｃｈｒｏ 菌素的含量。使用水稻纹枯菌为指示菌种，配制不同浓度的 ｍｏｇｅｎｅｓＮＪＹＨＷＧ６６３８２为试验菌株，应用响应面法系统考察 多抗菌素标品，牛津杯装液量为２００ Ｌ，置于２８℃培养箱中 μ 了影响多抗菌素效价的培养基成分，得到最佳培养基配方，从 培养４８ｈ。根据不同浓度标品和抑菌圈的大小，绘制标准 而提