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温州医学院硕j学位论文 三个Y-STR基因座在温州汉族群体中的遗传学研究 中文摘要 目的 基因频率，测算各Y-STR基因变异度。 2．计算三个Y-STR位点所构成的基因型的数目和频率，溺算基因变异度。研判 其在司法鉴定和群体遗传学上的价值。 方法 1．人Y-DNA标本的提取：应用Chelex法从男性外周血中提取DNA。 2．PCR扩增目的基因片段：在NCBI上查到三个Y-STR位点的引物序列；反应 总体积为20ul，在Px2Thermal ℃变性50s，60℃退火40s，72 4C延伸40s，循环35次后，72。C保持lOmin， 扩增产物4℃保存。 3．PAGE电泳分析(非变性)：在1XTBE缓冲液中，6％的聚丙烯酰胺凝胶，DYC Z-28B电泳槽上电泳，500伏电压电泳2个小时。 4．硝酸银染色：银离子和DNA片段结合，甲醛将银离子还原成银颗粒，在凝 胶上显示出DNA片段的位置，呈黄色。 5．凝胶成像分析：采用凝胶成像分析仪SC Gel 620，打开分析软件BioSens ImagingSystem。采集图像，并对条带的长短进行分析。 PCR purification Kit进行纯化。在Backman公司的Ceq8800测序仪上测序。 结果 1．弘GAllA．A4基因频率 在312个标本中，检测到Y-GATA—A4的5个等位基因，编为A、B、C、D、 E，基因频率分别为2．6％、43．9％、45．2％、6．7％、1 6％。基因变异度为O．7469。 2．DYS447基因频率 26、27、28、29，基因频率分别为O．6％、23％、31．6％、20．3％、27．1％、61％、 温州医学院硕士学位论文 lO．3％、1．6％。基因变异度为O．8804。 3．DYS460基因频率 在328个标本中，检测到DYS460的4个基因位点，编号为9、10、11、】2， 基因频率分别为34．1％、46．3％、18．9％、0．6％。基因变异度为O．8448。 4．三个Y-STR位点单倍型的分布结果 在300例温州汉族群体中，3个Y染色体特异STR基因座共观察到122种单倍 型，其中19种单倍型在两个以上个体检出，B／10／26和C／10／24频率最高，分 别是O．0933和O．0900。三个位点所形成的基因型具有很高的个人识别率，个人 识别率为0．9656。 5．三个Y-DNASTR位点在男女混合标本中的检测结果 Y-DNASTR为男性所独有，女性成分对检测无干扰，无需特殊处理，即可直 接进行分型。本研究中，混合男女标本，比例为1比lO，仍能成功检测出目标 片段。 ．． ． 6．运用三个Y-DNASTR位点鉴定一个家系中的四位男性结果 本研究中取一个家系中的祖父、父亲、叔叔和孙子外周血进行鉴定，结果四份 样本的三个STR位点的基因型完全柜同。 结论 0．7469、O，8804、O．8448，多态性非常好，识别力很高，适合用作亲子鉴定。 识别率，个人识别率为0．9656。 关键词 DYS460 Y_GAl’A—AtDYS447短串联重复序列多态现象(遗传学) 群体遗传学 温州医学院硕1j学位论文 ofThreeY—DNASTR in TheGeneticResearch Markers Han in Wenzhou