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中青年脑梗死患血管紧张素原基因多态性的研究
山西医科太学硕士学位论立
阿司匹林预处理对类缺血神经元的保护作用
捅要
目的:建立原代培养的利I经元类缺jIlL模型,观察预先使用阿司匹林进行的药物预适
应能甭减轻类缺血引发的神经元的损伤,爿粥其效果与缺m预适应相比较,探时阿司匹林
作为药物进行预处理措施的-·f行性及赎发挥作用的剂量,揭示阿司匹林的神经保护作用。
方法:取新生Wistar大鼠的大脑皮质神经元种植于培养板内进行原代培养,将体外
培养7d的大鼠皮质神经元进行鉴定后,随机分为正常对照组、直接缺J衄组、缺m预处理
组、不同浓度阿司匹林药物预处理组。分别进行相应处理:正常对照组不做任何处理;直
接缺血组给予缺血缺氧lh;缺JfIL预处理组在正式缺血之前的四天开始,每天提前给予短玎寸
I剐缺血缺氧预处理20mjn,共给予相应预处理3天,最后1天行缺血缺氧lh;低、中、高
浓度阿司匹林预处理组在正式缺J衄前l天加入相应浓度的阿司匹林,l天后行缺血缺氧lh。
用倒置显微镜观察神经元形态变化:用MTT比色分析法检测各组神经元活性;用流式细
胞术双染法(AIulexinv.FITC及PI)检测不同组别神经元的凋亡情况。
结果:神经元培养7天后,胞体增大具有折光性,多数呈锥体状或多极形,神经元
突起互联成网状。在缺m缺氧处理后少量神经元细胞突起减少或回缩,折光性减低。经
MTT比色分析,组问的神经元细胞活性有显著差别(PO.05):其中缺血预处理组和低浓
度阿司匹林预处理组的细胞活性均分别高于直接缺血组、中浓度阿司匹林预处理组和高浓
度阿司匹林预处理组(Po.05):而缺血预处理组和低浓度阿司匹林预处理组的细胞活性没
其中缺血预处理组和低浓度阿司匹林预处理组的细胞凋亡率均分别低于直接缺血组、中浓
度阿司匹林预处理组和高浓度阿司匹林预处理组(P0.05);而缺血预处理组和低浓度阿司
匹林预处理组之问的细胞凋亡率没有差别(PO.05)。表明预加低浓度的阿司匹林可以有效
的阻止神经元细胞活性下降,减少神经元的细胞凋亡,达到细胞保护的作用;且其效应与
缺血预处理的效应相同。
结论:本实验经M订比色及流式细胞学分析,在大鼠神经元类缺Jl匝缺氧之前,预先
加入低浓度的阿司匹林可以有效的减轻类缺血缺氧导致的神经元细胞活性下降,减少神经
元细胞的凋亡,产生细胞保护的作用;且这一药物预处理的效应与缺血预处理产生的缺氧
耐受效应相当。而预先加入中、高浓度的阿司匹林的分组未见此种细胞保护效应。
关键词:类缺血, 原代培养, 神经元. 阿司匹林, 药物预适应
山西医科大学硕士学位论盘
efI-ectsof
NeumpI.0tectiVeaspirinpharmacoIogicaI
in cultured翔t’sⅡeumnsischemic-Hke
primary f0Uowing
conditiOning
Abstract
the ofischemia—nkeinthe culturedrarscorlical
object~e:1-oinVesIigate primary
damage
neurons.Tb efrectsof ontheneuronsaJldt}le
explore aspmn optimal
protectjVe dosage.
Me出ods:Conicalneuronsculturedfor7 were diVidedintofiVe
days randomly gr
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