乙型肝炎病毒合e基因在毕赤酵母中的表达及产物免疫学特征的研究.pdfVIP

乙型肝炎病毒合成e基因在毕赤酵母中的表达及产物 免疫学特性的研究 专 业：临床检验诊断学 硕士研究生：蒲云 导 师：李林主任技师 摘要 目的：台成适合毕赤酵母表达的乙型肝炎病毒(HBV)e抗原基因，在毕赤酵 母中表达出高特异性和高免疫反应性湘重组乙型肝炎病毒c抗原(HBeAg)，方法： 基因，在两个不同的位点定向插入酵母表达载体pPICZaA，构建两种重组质粒 CZoA-eAg；采取基因搭桥法及Taq酶聚台反应，选用酵母偏爱的同义密码予替 换野生型e基因的部分密码于，制备合成e基因(syneAg基因)，在两个不同的 t 消化熏组质粒，用电转法将线性化的携带有野生奎和合成e基因的四种重组 导表达HBeAg。结果：酶切电泳及DNA撄I序证实野生型及合成e基因已正确克 隆到表达载体中；聚嗣烯酰胺凝胶电泳及EusA显示HBeAg在毕赤酵母中分泌 问无结合反应。结论：成功合成了适合毕赤酵母表达系统表达的HBVe基因及 炎瘸毒核心抗原闯无交叉抗原性、具有蹇好免疫反应性的HBeAg。 关键阐t乙特病毒肝炎e抗原：基因表达；毕赤酵母。 B e in of virus hepatitis genesynthesized Expression Pichia andthe pastoris immunological ofthe characterizatiOn product Medicine Laboratory Major：Clinical Name：XiYun Lin Supervisor：Li ABSTRACT wassuitablefor Bvimse which OBJECTIVE：Tohepatitis gene synthesize e inPichia and Bvirus expresshepatitis antigen(HBeAg)l proteinexpression yeast from PHBVl e was PCR plasmid gene amplifiedby pastoris．METHODS：HBV PCR wasinserted