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第二章 微生物发酵产酶 酶的生物合成：酶在生物体内产生的过程。 酶的发酵生产：通过人工操作控制，利用细胞（包括微生物细胞、植物细胞和动物细胞）的生命活动，产生人们所需要酶的过程。 1、酶发酵生产的细胞必需具备如下条件 ①酶的产量高； ②产酶稳定性好； ③容易培养和管理；发酵周期短，营养需求简单 ④产物杂质少，利于酶的分离纯化； ⑤安全可靠，非致病性。 2、酶的发酵生产的种类 根据微生物培养方式的不同可分为： 固体培养发酵 液体深层发酵 固定化微生物细胞发酵 固定化微生物原生质体发酵 1）. 固体发酵法 定义：利用麸皮和米糠为主要原料，添加谷壳，豆饼等，加水拌成半固体状态，供微生物生长和产酶用。 浅盘法、转桶法、厚层通气法 （1）浅盘法：将固态培养基平铺在浅盘（多为木 盘或竹匾）内，厚约3-5厘米，在能够控制湿度、温度的曲房里进行发酵。 该法占用曲室面积大，曲盘数量多．全部依靠手工操作，劳动强度大，卫生条件也差，曲盘洗清灭菌、维修等耗蒸汽和材料也很多．且产量和质量不易稳定，现代工业生产已很少应用。 （2）转桶法：将固态培养基接入菌种后，放在可旋转的转桶内，当桶慢慢转动时，培养基即在转桶内翻动，通气及温湿度调节较为均匀，有利于微生物的生长和产酶。本法的机械化程度较上法稍高．劳动强度也有所减轻，但转桶的清洗灭菌操作较难。 （3）厚层通气法：将固体培养基接入菌种后，平铺在具有多孔的大池内，厚度可达20-30厘米；待微生物已开始生长，即从池底通入一定温度和相对湿度的空气，使微生物比较均匀适宜地生长繁殖和产酶。本法与前两种方法比较，设备利用率大大提高．发酵中途也不必人工经常翻曲，劳动强度减轻，是采用固体发酵法中较好的一种办法。 产品描述 规格范围:直径2m-12m 园盘固体发酵机（园盘式自动微生物培养床），是在微生物培养平床的基础上不断改进，并吸收国外某些先进经验，设计制造。通过实践证明，比微生物培养平床更先进，更优越，其条件更合适微生物的生成、发育。  园盘式自动微生物培养床（园盘制曲机）的主要特点 1、 实现了机械化操作，入料、出料、培养过程中的翻料，均由机械实现操作，在整个操作过程中，人与物料不直接接触，避免了人为的污染。  3、 水、电汽等能源消耗比普通微生物培养平床降低。 4、 减少劳动力，提高劳动生产率，降低工人劳动强度，改善工人工作环境。 5、 微生物在整个培育过程中，始终处于一个密闭的环境里，只须通过观察窗进行控制 固体培养的优缺点 优点：①设备简单，投资较少。②环境污染少；③特别适用于霉菌的培养和发酵产酶。 缺点 ：①劳动强度大；②原料利用率低；③产酶纯度较差；提取精制较难；④传质传热效率低，发酵条件不易控制均匀，产酶不稳定；⑤不宜胞内酶生产（菌体分离难度大） 2）液体发酵 液体表面发酵，目前已不采用。 液体深层通风发酵 本法是我国目前酶制剂发酵最广泛应用的方法1），所用主要设备发酵罐是一个具有搅拌浆叶和通气系统的密闭容器。发酵罐的容量．国内多采用10一50t，国外普遍用100t以上。目前从培养基灭菌、冷却到发酵都在同一罐内进行。 优点：①产酶纯度高，质量稳定； ②较易控制发酵条件，有利于自动化控制；③机械化程度高，劳动强度小；设备利用率高。 缺点：设备投资较大 发酵车间 液体发酵与固体发酵的区别 液体发酵与固体发酵的区别在于，液体发酵是将固体原料转换为液体状态，然后进行发酵，发酵过程完成后，再转换为固体粉未状产品。从生产过程中看，固体发酵比液体发酵减少环节，流程简短，所以成本较低。目前国内外的生产厂家大多采用液体深层发酵工艺，液体发酵设备价格贵, 生产成本高，但操作较容易，生产过程中消毒灭菌容易实现，易于实现自动化操作，酶的产率高，质量稳定，产品回收率高，而固体发酵难于自动化，人工需要量大，易造成杂菌污染。 3）固定化微生物细胞发酵 任何能够限制发酵微生物自由移动的技术都有利于提高发酵速率。微生物的固定化发酵技术就是基于这一原理而设计的。该技术始于20世纪70年代，是利用特殊的固定化载体把微生物菌体固定起来，使之成为连续的生物反应器。微生物的固定化主要有包埋法、吸附法、交联法和微胶囊化4种方法。 4）固定化微生物原生质体发酵 渗透压稳定剂--渗透压在原生质体制备中，不仅起到保护原生质体免于膨胀作用，而且还有助于酶和底物的结合。渗透压稳定剂多采用KCl、NaCl等无机物和甘露醇、山梨醇、蔗糖、丁二酸钠等有机物。菌株不同，最佳稳定剂亦有差异。在细菌中多用蔗糖、丁二酸钠、NaCl等，在酵母菌 中多用山梨醇、甘露醇等，在霉菌中多用KCl和NaCl等。稳定剂的使用浓度一般均在0.3～0. 8mol/L之间。 第一节 酶生物合成的基本理论 一、RNA的生物合成——转录 二