外周血单个核细在不同条件下hsp70形成的研究.pdf

外周血单个核细胞在不同条件下HSP70形成的研究 硕士研究生：刘世文 指导教师：杜怀东 副教授 专业7名称：临床检验诊断学 摘 要 shock 目的：热休克蛋白(hot protein，HSP)又称作分子伴侣， 是所有细胞能在应激情况下所产生的一组蛋白质。根据分子量的大小 重要的一种。HSP70被认为同时与新生的多肽链结合部分，HSP70作为 防止蛋白质的聚集及错误折叠的媒介。HSP70与机体的生理作用密切相 关，参与细胞内的许多功能，如蛋白质折叠、运转、成熟及降解。目 前对HSP的研究成为热点，但HSP的确切作用还仍未了解，特别是介 质对热休克蛋白形成的影响研究未见报道。本试验的目的是通过人外 周血单个核细胞不同时间内在不同pH和不同介质中HSP70形成的研 究，探讨影响热休克蛋白形成的因素。 方法：抽取无发烧、无炎症的健康志愿者外周血，应用密度梯度 法分离单个核细胞，分别在不同pH的AB型血清和不同介质(1640培 养液、AB型人血清、PBS缓冲液)中42℃水浴中热休克0．5、1小时， 用免疫组化法测定热休克蛋白70的形成。 结果．夕h周血单个核细胞在不同pH的AB型血清中42℃热休克0．5、 1小时，热休克蛋白70的表达与未作热休克处理的空白比较有明显差 血清中42℃热休克0．5、1小时热休克蛋白70的形成无明显差异，P ·1。 U．U5。 外周血单个核细胞在不同介质中42 4C热休克0．5、1小时，热休克 蛋白70的表达与空白比较有显著性差异，PO．01。在磷酸盐缓冲液 中42℃热休克0．5、l小时，热休克蛋白70的形成有明显差异，PO．Ol， 0．5小时的表达高于l小时；1640培养液中42℃热休克0．5、1小时， 热休克蛋白70的表达差异不明显，PO．05。 结论：(1)外周血单个核细胞热休克蛋白70形成的量与应激源数 量密切相关，多种应激源刺激热休克蛋白质70形成的量比单一应激源 刺激形成的快。(2)碱性条件下外周血单个核细胞也可产生热休克蛋 白。(3)外周血单个核细胞热休克蛋白的形成与细胞所处的介质密切 相关。 关键词：单个核细胞热休克蛋白 免疫组化染色密度梯度 ·2· of hotshock on blood the of peripheral Study expression protein in conditions various cells mononuclear Shi—wen Postgraduate：Liu Du Tutor：Professor Huai-dong test diagnostics Speciality：Clinical Abstract alsocalled shock molecular ob