应用飞行质谱技从血清中筛选肠癌标志蛋白.pdfVIP

中国医科大学研究生学位论文独创性声明 本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的 地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包 含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一 同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说 明并表示谢意。 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。 论文作者签名：】强勐拴 日期：也：]-』：颦 中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书 本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究 生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学．本人保 证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科 大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学 校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许 论文被查阅和借阕。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密 内容除外)，以采用影印、缩印或其他手段保存论文。 论文作者签名：I邀当毖 指导教师签名： ≥里i 日 ·中文论著摘要· 应用飞行质谱技术从血清中筛选肠癌标志蛋白 前言 随着蛋白组学的提出和人类DNA框架基本完成，生命科学进入了后基因时 代。研究目标从单个基因转向一群基因(基因组)和功能基因，从遗传信息转向生物 功能，开始从整体组织和细胞内的蛋白质角度研究生命活动的基本规律。基因组序 列翻译为相应功能蛋白，使生物学功能得以实现。但二维的基因组学难以充分预测 蛋白质的三维结构及其动力学，基因本身有多态性，使基因有多种表型，给单纯基因 诊断带来了不确定因素。要彻底了解生命本质，必须了解蛋白质在生命现象中的作 用和相应的机制。蛋白结构或量的变化导致了疾病的发生。机体内绝大多数调控 过程、疾病的发生机制、药物的靶标均发生在蛋白水平。有人认为，后基因组学， 特别是蛋白组学将成为21世纪生命科学研究最重要的内容。就临床角度而言，蛋 白组学更具有应用价值。实际应用表明，对如癌症、心血管病这些多基因疾病，基因 诊断阳性率远低于单基因遗传性疾病。比较疾病组织和正常组织的蛋白组的差异 往往能鉴别出特定疾病对应的特异蛋白，使之成为疾病的标记或药物的靶分子。现 有的蛋白质分析方法只能检测1000余种蛋白，按现有技术，大量的可能携带疾病 信息的蛋白无法检出。实际上，有效的单一蛋白质标志极少，许多重要的疾病由于缺 乏好的标志导致诊断不精确或诊断不及时。许多学者深信，如果能根据一组蛋白质 的变化来判断疾病，预测和诊断疾病的准确性将大大提高。检测疾病的蛋白组学变 化将比当前常规检测、基因检测更准确、有效。许多疾病将出现新的诊断指标，大 D．Von 大改变当前诊断学的落后状态。亚利桑那大学癌症中心主任DanielHoff认 为，应用SELDI．TOF测定蛋白组学最有价值，血清蛋白组学图谱的应用，将为肿瘤 学的理论和实际工作带来重大影响，在很大程度上改变肿瘤的治疗和预防措施。 SELDI．TOF．MS是一种应用特殊的增强表面芯片结合激光解吸离子化飞行时 间质谱分析样品中蛋白质的技术，具有微量、快速、高通量等特点，尤其适于分析低 分子量、低丰度的蛋白质。2002年日本田中耕一因发明该技术而获取诺贝尔化学 正常人血清中蛋白质成分的变化，以获得用于肠癌诊断的特异性相关蛋白。 材料与方法 用美国ciphergen 检测结直肠癌患者和正常人血清蛋白质的相对含量， 应用BiomarkcrWizard软件 分析肠癌组与对照组间相同质荷比的蛋白质峰值表达差异的P值，筛选可用于结直 肠癌早期诊断的血清蛋白质特异性生物标志物。 结果 患者的血清中低表达，11851Da在患者血清中高表