慢传输型便秘大血浆及肠道胃动素变化的实验研究.pdfVIP

中文摘要 慢传输型便秘大鼠血浆及肠道胃动素变化的 实验研究 摘 要 目的：本研究课题利用大黄灌胃建立慢传输型便秘大鼠 模型，通过测定模型大鼠血浆及十二指肠、回肠、横结肠组 织匀浆中胃动素(MTL)含量，观察模型大鼠肠道胃动素免疫 反应性变化，探讨血浆及肠道MTL水平与慢传输型便秘的 关系。 方法：1、动物分组：选取健康Wistar大鼠40只，雌雄 各半，按照完全随机的方法进行分组，实验组20只，对照 组20只，分组后各组间体重、性别无显著性差异。 2、动物处理：实验组采用大黄浸液灌胃，首日剂量为 800mg／kg(生粉)，此后每日剂量在前一日基础上增加 200mg／kg(生粉)，直至实验组出现半数大鼠粪便变稀，保持 剂量至80％的稀便消失，继续加量给药，至又有半数大鼠粪便 变稀，如此程序循环3次，待实验组第三次80％的稀便消失 一周后停止建模，对照组以同等体积蒸馏水灌胃。 3、标本取材：实验组及对照组大鼠禁食8小时后乙醚 麻醉，股动脉取抗凝血3ml，切取距幽门5cm十二指肠、距 回盲瓣5cm回肠、横结肠中段组织各两块，每块长约1cm， 其中一块组织多聚甲醛固定，包埋切片后进行HE染色、MTL 免疫组织化学染色，观察免疫反应阳性细胞数量及形态变 化。另一块组织称重，匀浆，应用荧光分光光度法测量血浆 及组织匀浆中MTL含量。 中文摘要 4、半定量分析：根据MTL免疫反应阳性细胞的分布密 度及活动性强弱，做相对半定量比较。所有视野未见阳性细 胞为(．)；有少数阳性细胞为(+)，染色为淡黄色；阳性细 胞较多见为(++)，染色为棕黄色；阳性细胞多见为(卅)， 染色为棕褐色。 5、图像分析：在CMIAS系列多功能病理图像分析系 统下，每组选5例染色良好的切片，在显微镜物镜放大10 倍下观察，每张切片随机选取5个视野，共25个视野摄 入计算机(分辨率为800x600)，测量每个视野阳性染色区 域的表面积密度，即面密度。最后计算每组的平均值。并 用尼康光镜照相机拍摄典型视野。 6、统计分析：本实验计数资料数据采用X±s表示，应 用SPSSl0．0统计软件，选用成组t检验进行统计分析，检验 水准a=0．05。半定量分析结果采用Excel编程统计，检验方 法)，检验水准a=0．05。 结果：1、肠道大体病理变化及HE染色：两组大鼠肠道 外观无明显差别，结肠粘膜无色素沉着。对照组大鼠肠道切 片HE染色未发现病变，实验组大鼠肠道切片HE染色可见 粘膜慢性炎症改变。 2、MTL免疫组织化学结果：肠道的MTL免疫组织化 学染色显示其阳性产物呈棕黄色沉淀。十二指肠、回肠粘膜 及粘膜下层可见MTL免疫反应阳性细胞分布，MTL免疫反 应阳性细胞呈圆形，着色淡。实验组及对照组十二指肠肌层及 肌间神经丛、回肠肌层及肌间神经丛以及横结肠全层未见阳 性细胞及阳性纤维。实验组十二指肠MTL免疫反应性较对 中文摘要 照组明显降低(P0．05)。 对MTL免疫组织化学图像分析的结果与半定量分析 一致。 3、血浆中MTL含量：实验组大鼠血浆中MTL含量较 对照组降低(pO．05)。 4、肠道组织匀浆中MTL含量：实验组及对照组大鼠十 二指肠组织匀浆中MTL含量均高于同组回肠组织匀浆中 含量较对照组十二指肠组织匀浆中MTL含量降低(po．05)， 实验组大鼠回肠组织匀浆中MTL含量较对照组回肠组织匀 浆中MTL含量降低(po．05)；实验组及对照组大鼠横结肠组 织匀浆中MTL均未测出。 结论：1、应用大黄灌胃制造STC大鼠模型更为精确， 是探讨STC发病机制的一个较好模型。 2、大鼠MTL主要集中在近端小肠，在结肠中没有分布。 慢传输型便秘大鼠血浆与肠道粘膜MTL含量及免疫反应性 降低，血浆及肠道粘膜MTL水平与STC有一定相关性。 关键词： 慢传输型便秘；动物模型；血浆；肠道；胃 动素(MTL) 英文摘要 of of in and T