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冻融人卵巢组织异种移植的卵泡保护和血管生成的初步研究 中文摘要 冻融人卵巢组织异种移植的卵泡保护 和血管生成的初步研究 专 业：妇产科学 硕士研究生：龙惠东 导 师：周灿权教授 摘 要 随着现代肿瘤治疗方案的发展，肿瘤病人的生存率得以提高，也有越来越多 非肿瘤疾病(例如系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病)的病人需要接受细胞毒性 药物治疗。由于卵巢组织对化疗、放疗损伤的敏感性，这些治疗都可能会造成卵 巢功能损害。此外，某些因盆腔良性疾病需要行卵巢切除者，或有家族性卵巢早 衰的妇女，都有可能面临着卵巢早衰和生育力的丧失。因此，目前对于卵巢功能 保护的需求已日益受到关注。 卵巢组织冷冻保存可用于保存女性生殖功能，卵巢组织冻存的主要优点是 标本的收集不需要接受超排卵药物的刺激，不延误肿瘤的治疗，而且，由于始基 卵泡的结构和代谢处于静止状态，可以较好地耐受冷冻，因此卵巢组织冻存可以 保存大量的始基卵泡。卵巢组织的冷冻方案和效果已经较为稳定，以卵巢组织片 的慢速冷冻为主，卵泡存活率可达到70～90％。目前，冻融人卵巢组织自体移 植的可行性已被两个健康婴儿的出生所证实。自体移植可以分为原位移植和异位 移植，原位移植的好处是可以恢复正常的生殖功能和自然受孕，但是一些病人会 存在输卵管功能缺陷或盆腔粘连，自然妊娠的机会下降。预期冻融后移植的卵巢 组织片只有相对短的寿命，原位移植需要进行腹腔镜手术，反复的移植意味着多 次腹腔镜手术，这对病人是一种负担，异位移植可能更合理。异位移植的部位包 冻融人卵巢组织异种移植的卵泡保护和血管生成的初步研究 中文摘要 括皮下、肌肉内、肾囊下等。皮下移植操作比较简便，重复性容易被接受，易于 监测卵泡发育和取卵，有一定的空间适合卵泡生长。皮下移植的可行性已经有大 量的研究报道，LeeDM等将猴卵巢组织自体移植在皮下，通过体外受精，在代 孕母猴生下了子代，OktayK等报道移植冻融后人卵巢组织到腹部皮下，从移植 物中获取卵子进行体外受精，获得了一个4细胞胚胎，M．Rosendahl等报道冻融 人卵巢组织的自体异位移植获得了生化妊娠。 影响卵巢组织移植成功率的主要原因之一是移植后缺血再灌注损伤导致大 量卵泡丢失。多个研究表明移植后卵巢中卵泡的丢失主要是由于在移植早期缺血 缺氧及再灌注损伤所致，而非直接的冷冻损伤，移植后卵巢组织中始基卵泡的丢 失可达50～65％。因此，有必要找到有效的方法来促进血管生成和减轻缺血缺 氧、再灌注损伤。WangH等在小鼠的研究中认为皮下移植前给予促性腺激素处 理可以改善卵泡的存活，可能是由于促进了VEGF基因表达，改善血管生成。但 Schnorr J等发现局部给予VEGF并不能改善移植物中始基卵泡的存活，可能是 因为外源性VEGF在体内代谢较快的原因。也有学者研究在缺血阶段通过应用抗 氧化剂减轻损伤。D．Nugent等认为使用维生素E可以减轻移植在小鼠肾囊下的 卵巢皮质块的缺血再灌注损伤，卵泡存活率从45％提高到72％；但Weissman等 却并没有发现维生素E能提高卵泡存活率。Kim等报道卵巢组织片在体外缺血时 期添加维生素C可以减少缺血损伤，减少卵泡和基质细胞的凋亡。 还原型谷胱甘肽(ReducedGlutathione，GSH)，是机体内的一种强抗氧化剂， 含有较多的巯基，可与体内自由基结合，直接使自由基还原，加速自由基清除，参 与细胞的防御机制，包括细胞解毒及细胞的损伤与修复等，可以作为谷胱甘肽过 氧化物酶的底物，抑制脂质过氧化，保护细胞膜完整性，维持细胞的正常代谢和 功能。临床研究观察证明，6SH作为抗氧化剂和细胞代谢调节剂，在多学科、多病 种特别是重症病人救治中是重要的治疗和辅助治疗药物。乌司他丁(Ulinastat— in，UTI)是一种高效广谱的酶抑制剂，对胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶和 透明质酸酶等有抑制作用。近年来研究显示，UTI不但能够抑制多种酶的活性，另 具有稳定溶酶体膜以及清除氧自由基，抑制多种炎症介质的过度释放，阻断应激 时炎症因子与白细胞之间的联系，改善微循环等多种特殊的药理