氨氯地平和依普酮联合应用在缓解盐敏感高血压所致肾脏损害中作用机制的研究.pdfVIP

·中文论著摘要· 氨氯地平和依普利酮联合应用在缓解盐敏感高血压所 致肾脏损害中作用机制的研究 研究背景和目的 世界范围内大约10亿人正在受到高血压的困扰。临床研究表明：大约50％ 的高血压患者为盐敏感高血压。而盐敏感高血压正是导致心血管疾病以及肾脏功 能损害的最为重要的致病因素之一。有研究表明：肾功能不全的发生与。肾间质纤 维化具有极为密切的关系。一些研究发现：慢性。肾问质缺氧在肾问质纤维化中发 挥了重要作用并最终导致肾功能不全的发生。此外，一些导致慢性肾间质缺氧的 诱因也已经查明，其中最为重要的是‘肾小管周毛细血管损伤以及血流减少。 ’缺氧导致的ATP耗竭，会导致。肾小管上皮细胞内钙离子浓度升高以及线粒体 的损伤并进而导致细胞凋亡。L型钙通道阻断剂可以显著降低由缺氧所导致的肾 小管上皮细胞凋亡。此外，有人发现L型钙通道阻断剂还可以最著降低由肾脏缺 血再灌注所导致的。肾脏各类细胞凋亡以及由血管紧张素Il所导致的肾小管周m缺 血。以上研究暗示，一些临床研究中L型钙通道阻断剂的肾脏保护作用可能是通 过对肾问质缺氧的抑制而实现的。然而氨氯地平在高血压中肾脏保护作用的机制 尚需进一步研究。 传统认为，醛固酮通过作用于远端肾单位来渊节体内电解质平衡以及血压的 稳定。但是最近人们对醛固酮的认识发生了变化。越来越多的证据表明，醛固酮 在心血管以及肾脏损害过程中发挥了重要的作用。在肾脏损害方面，许多研究证 明：醛固酮水平的升高可以导致蛋白尿、肾小球硬化以及。肾间质纤维化。亦有研 究发现，在醛固酮持续灌注SD大鼠中，肾小球表达的正常足细胞标记物podocin 和nephrin显著降低，然而损伤足细胞标记物desmin表达却显著升高。盐皮质激 素受体(MR)阻断剂依普利酮可以显著改善由醛固酮水平升高导致的足细胞损伤 以及蛋白尿。因此，足细胞损伤的治疗将具有重要临床意义。以上研究提示，MR 在足细胞损伤中可能发挥了重要作用，其可能机制尚需进一步研究。并且，联合 应用氨氯地平和依普利酮是否能够提供更好的肾脏保护作用尚需研究。 本研究首次研究了氨氯地平和依普利酮联合应用对于高盐诱导的Dahl 了深入探讨。 方法 高盐饲料诱导的盐敏感高血压合并。肾脏损害动物模型的建立 salt．sensitve 6周龄Dahl fDS)大鼠饲以0．4％低盐饲料或4％高盐饲料，每两 周行血压测定以及24小时尿蛋白测定。至第16周龄时，相对于低盐饲料喂养DS 大鼠，高盐饲料喂养DS大鼠的收缩压(SBP)超过170 mmHg并且尿蛋白超过 70 mg／24h。组织学检查可见严重肾小球硬化以及肾间质纤维化。以上结果证实： 高盐饲料诱导的赫敏感高血压合并肾脏损害动物模型建立成功。 实验动物分组：6周龄DS大鼠40只随机分为两组：对照组(8只，LS)喂 以0．4％低盐饲料(OrientalYeast，大阪，日本)，实验组(32只，HS)喂以4％高 盐饲料(OrientalYeast，大阪，同本)。8周龄时将实验组大鼠进一步随机分为4组： 阳性对照组(8只，HS)，氨氯地平治疗组(8只，3 mg／kg／day，HS+A)，依普利 酮治疗组(8只，50 时问均为8周。整个实验过程共计10周。 实验期l’只J，每两周采』lj套尾法测量m压以及代酣笼采集24小时尿液各一次。 血浆和肾脏标本在苯巴比妥麻醉状念下采集，其中肾脏首先行生理盐水灌注冲洗， 7．4)固定石蜡包埋用于组织学检查，或者直接 然后切片放入10％福尔马林(pH 放入OCT冰冻切片包埋剂制作冰冻切片用于激光捕获微分离(LCM)。剩余肾脏 组织放入液氮冷冻并且放入一80℃深低温冰箱保存。 1．尿液及血液生化学检查 通过24小时尿蛋白和尿肌酐测定以及血肌酐测定，了解肾脏功能损害情况。 通过对血浆钠离子、钾离子和醛固酮水平测定了解体内电解质代谢状况。 2．组织学检查 通过PAS染色对肾小球硬化的程度进行评估。通过Azan染色对肾间质纤维 化进行评估。 3．免疫组织化学检查 通过对缺氧标