氯法拉滨联合硼佐米对白血病细胞株k562细胞增殖与凋亡影响的实验研究.pdfVIP

11 111 lIIIIIIIIIii1111111111 1111 目 录 Y2336863 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………4 研究论文氯法拉滨联合硼替佐米对白血病细胞株K562细胞增殖与凋亡 影响的实验研究 前言…………………………………………………………………………………………·88 日U吾…………………………………………………………………………………………。 材料与方法……………………………………………………………·9 结果………………………………………………………………………………………··15 附图…………………………………………………………………·17 附表………………………………………………………………………………………··22 讨论………………………………………………………………………………………··25 结论……………………………………………………………………··…………………29 参考文献……………………………………………………………·30 综述嘌呤类似物在血液系统肿瘤中的应用……………………………33 致谢………………………………………………………………………………………………·43 个人简历…………………………………………………………………·44 中文摘要 氯法拉滨联合硼替佐米对白血病细胞株K562细胞 增殖与凋亡影响的实验研究 摘 要 目的：白血病是一种发生在造血干细胞的恶性骨髓增殖性疾病，分为 急性白血病与慢性白血病。其中慢性粒细胞白血病(cllromc leuke．mia，C池)占成人白血病的150／旷20％，病程发展较慢。近年来，随着 分子生物及细胞遗传学等学科的快速发展，使得人们对CML的发病机制 有了更深入的认识，并在此基础上探索出了许多新的治疗方法。 氯法拉滨是第二代嘌呤核苷类衍生物，FDA已批准用于治疗儿童难 治性或复发性ALL，是近10年来首个FDA批准专门用于治疗儿童白血 病的新药，该药使部分患儿的疾病得到了持续的缓解并且使患者得到接受 骨髓移植的机会成为可能。同时该药在复发或难治性AML的患儿中也显 示出希望。临床研究表明该药具有广谱抗肿瘤特性，在儿童和成人的 ALL，AML，MDS和CML中，均获得了满意的治疗效果。 硼替佐米是一种蛋白酶体抑制剂，前期研究已经证实硼替佐米对 K562细胞系有抑制增殖，诱导其凋亡的作用，并且可增强细胞中SHIP 基因的表达水平。研究显示硼替佐米在体外对多种恶性肿瘤细胞株均有一 定的抑制作用，该药与许多药物合用呈现协同或增敏作用，而不是单纯的 相加作用【321。 SHIP基因属于肌醇5’磷酸酶家族，其主要功能是抑制P13K／Akt通路， 使细胞发生程序性死亡。本课题前期研究已证明白血病细胞K562中SHIP 基因表达缺失，该基因可抑制K562细胞增殖，诱导K562细胞凋亡。 目前有关氯法拉滨对K562细胞抑制增殖的研究报道尚少，为进一步 明确氯法拉滨抑制K562细胞增殖及促凋亡的确切机制，本实验拟采用氯 法拉滨单独或联合硼替佐米作用于K562细胞，观察其对K562细胞增殖 抑制、诱导凋亡的影响，同时了解经氯法拉滨单药和联合硼替佐米处理后， K562细胞中SHIP基因表达水平的变化及其作用，为慢性粒细胞白血病 的治疗提供理论依据。 力-i去： 中文摘要 1 CCK8检测不同浓度的氯法拉滨单药及联合硼替佐米对K562细胞 增殖的影响； 2流式细胞分析法分别检测氯法拉滨单药和联合硼替佐米对K562细 胞凋亡的影响； 3RQ．PCR检测氯法拉滨单药和联合硼替佐米作用于K562细胞后， S}玎PmRNA的表达变化