趋化因子受体ccr4与人卵巢癌侧群细胞侵袭转移能力关系的初步探讨.pdfVIP

趋化因子受体CXGR4与卵巢癌侧群细胞侵袭转移关系的 初步探讨 硕士研究生： 王伟 导 师： 王沂峰教授 学科专业： 妇产科学 中文摘要 研究背景与目的 卵巢癌是严重威胁妇女生命健康的恶性肿瘤，其死亡率占妇科肿瘤的首位。据 统计，约70％的卵巢癌病人在就诊时已有局部或远处的转移灶，近十几年来，虽然手 术和化疗的治疗方案有所改进，但晚期患者的5年生存率仍低于30％。复发和侵袭转 移是影响患者预后最主要的因素。研究表明，恶性肿瘤组织中存在一小群具有干细胞 样特性的肿瘤干细胞，具有自我更新、增殖分化和侵袭转移的能力，它们是肿瘤发 生、发展、侵袭和转移的根源。如果能阐明这群肿瘤细胞侵袭转移的分子机制，便 可靶向性阻止肿瘤细胞发生侵袭转移，从而有效防止肿瘤转移。许多研究表明，肿 症细胞提供迁移信号、并使之活化、进而启动其定向移动并使之准确定位中扮演着 至关重要的角色。近年来研究发现，许多肿瘤细胞可以限定性地表达某些趋化因子 受体，提示趋化因子及其受体可能通过与炎症细胞浸润相似的机制参与了肿瘤的发 cell-derivedfactor 展、恶化和侵袭转移。趋化因子SDF一1(stromal 1)及其受 体CXCR4相互作用构成的反应轴越来越受到人们的关注。 为探索SDF一1／CXCR4生物学轴(SDF一1／CXCR4axis)与卵巢癌肿 biological 瘤干细胞侵袭转移的关系，我们以人卵巢癌细胞系OVCAR3中的具有干细胞样特性的 侧群细胞为研究对象，检测了趋化因子受体CXCR4的表达情况并初步探讨 向针对SDF-1／CXCR4生物学轴，可能有效抑制卵巢癌肿瘤干细胞的侵袭和转移。 方法 第一部分：人卵巢癌OVCAR3细胞系中侧群细胞的分离及其干细胞样特性的鉴定 (Side 实验，比较这两亚群细胞的体外增殖能力；通过体外完全培养基长期培养实验，比 较这两亚群细胞的不对称分裂能力；利用Transwell小室法，检测两个亚群细胞的 体外侵袭力。 侵袭性的影响 利用细胞免疫荧光染色技术，检测侧群细胞和非侧群细胞中趋化因子受体CXCR4 剂AMD3100对卵巢癌侧群细胞体外侵袭能力的影响。 结果 一人卵巢癌OVCAR3细胞系中侧群细胞的分离及其干细胞样特性的鉴定 (verapamil)组侧群细胞的比例降为1．8％。 3．06)％，侧群细胞的克隆形成率高于非侧群细胞(PO．05，差异有显著性)。 3．分选获得的侧群细胞亚群经体外培养2周后可增殖分化产生侧群细胞(28．1％) 及非侧群细胞(71．9％)，而非侧群细胞亚群经体外培养2周后仅产生比例极低 的侧群细胞(0．7％)。 力明显强于非侧群细胞(PO．05，差异有显著性)。 二探讨趋化因子SDF-1及其受体拮抗剂AMD3100对卵巢癌侧群细胞侵袭性的影响 5．细胞免疫荧光染色结果显示：趋化因子受体CXCR4在侧群细胞中表达，而非 侧群细胞则不表达。 2 有显著性)。 结论 癌侧群细胞体外增殖和侵袭能力均明显强于非侧群细胞，并具有不对称分裂 能力，可作为研究卵巢癌肿瘤干细胞生物学特性的细胞模型。 2．CXCR4在卵巢癌OVCAR3细胞系侧群细胞中表达。 1 抑制剂AMD300能抑制这种侵袭活性。 4．趋化因子SDF-1及其受体CXCR4的相互作用可能在卵巢癌侧群细胞侵袭转移 中发挥重要作用，干扰SDF-1／CXCR4的相互作用可能成为肿瘤治疗的一个有 意义的靶点和策略。 关键词：卵巢癌；侧群细胞；肿瘤干细胞； SDF-1／cxcr4轴；侵袭 A the betweenthe