pi3kakt路的活化与肺癌细胞对吉非替尼反应性的关系.pdf

主窒塑墨 一．—— ————————————————————————————————————————————————————一 中文摘要 目的 通过体外研究探讨P13K／Akt通路与吉非替尼对肺癌疗效的关系，探索pAkt 及其所在通路对吉非替尼疗效的预测价值，有助于临床筛选出吉非替尼治疗的 优势人群。在吉非替尼敏感性不同的肺癌细胞株中，通过抑制P13K／Akt信号通 路的活化，分析吉非替尼对肺癌细胞的抑制效率的改变规律，进一步探讨吉非 替尼的耐药机制，同时探讨pAkt可能是逆转肺癌吉非替尼耐药、提高其疗效的 治疗靶点之一，从而有望通过联合用药或多靶点药物来逆转耐药，为吉非替尼 耐药人群后续治疗的选择提供一定的参考。 方法 吉非替尼敏感性的影响。 选取H292、H1975、H460和H446 4株细胞，用无血清的培养基饥饿24小 时后，分为以下四组处理：吉非替尼59M组、LY294002109M组、LY294002 Blot 10I，tM+吉非替尼59M组及正常对照组，加药2小时后提取蛋白，用Western 5种蛋白的表达量， 免疫印迹法观察肺癌细胞Akt、pAkt、P13K、EGFR和pEGFR P13K／Akt通路活化的影响。 结果 LY294002和吉非替尼对各组肺癌细胞均表现出抑制作用，且呈浓度依赖性。 而当LY294002和吉非替尼联合作用时，吉非替尼对细胞的抑制作用增强，且随 H460、H358及H446的LY294002 IC50浓度分别为17．069M、16．579M、 1BM、 10．339M、39．649M；LY294002 3．99M、4．19M、11．699M；LY294002lOgM处理后吉非替尼IC50浓度为O．71aM、 中文摘要 O．67uM、1．19M、1．4¨M、2．419M。LY294002 H358和H446较单用吉非替尼组吉非替尼敏感性分别提高65．32％、20．31％、 72．71％、58．16％、68．15％；LY294002 H446较单用吉非替尼组吉非替尼敏感性分别提高95．51％、89．53％、92．30％、 感性，且在吉非替尼耐药细胞中提高幅度更加明显。 正常情况下，吉非替尼敏感株H1975肺癌细胞P13K／Akt通路上游蛋白EGFR 及pEGFR和P13K／Akt通路相关蛋白pl10a、Akt及pAkt表达量都很高，Akt及 H460和H446 3株吉非替尼耐药肺癌细胞虽有较高的Akt表达，但pAkt、EGFR 联合吉非替尼作用于肺癌细胞时，吉非替尼对肺癌细胞EGFR和Akt磷酸化的 抑制作用明显增强，且在吉非替尼耐药的细胞株中更加明显。 结论 研究结果提示了P13K／Akt通路在肺癌细胞对吉非替尼敏感性中起重要作 用。同时提示pAkt阳性可能不是非小细胞肺癌吉非替尼有效的独立预测因子， 但pAkt的高表达可能预示非小细胞肺癌对吉非替尼有较好的反应。P13K抑制剂 LY294002可明显增强非小细胞肺癌耐药细胞和小细胞肺癌细胞的吉非替尼敏感 肺癌的吉非替尼耐药。 关键词：非小细胞肺癌，小细胞肺癌，吉非替尼，LY294002，P13K／Akt通路 II Abstract Objective effect oftheP13KJAkt forthecurative Tb the