不同干预措施对喘大鼠免疫耐受的影响.pdfVIP

中文摘要 不同干预措施对哮喘大鼠免疫耐受的影响 摘 要 目的：“Thl／Th2偏移假说是哮喘发病的主要免疫机 制，但近年的研究发现该学说不能完全解释哮喘的免疫学异 常，提出哮喘是一种对过敏原免疫耐受缺陷性疾患，但尚无 系列研究证明这种理论。本研究旨在分别应用腹腔注射地塞 米松、卵白蛋白(ovalbumin，OVA)特异性免疫治疗以及 两者联合治疗的方法建立哮喘大鼠免疫耐受模型，进而探讨 不同干预措施重建哮喘大鼠免疫耐受的可能性及其机制。为 临床上合理选择哮喘治疗方案提供理论依据。 方法：60只SPF级雄性Sprague 北医科大学动物实验中心提供)，适应性饲养一周后，随机 分为生理盐水对照组(NS组)、单纯哮喘组(A组)、哮喘 地塞米松治疗组(D组)、哮喘免疫治疗组(S组)、地塞米 松和免疫治疗联合干预组(DS组)。每组均为12只。以卵 蛋白腹腔注射致敏和雾化吸入激发制备大鼠哮喘模型。在哮 min用水溶性地塞米 喘模型基础上，D组在每次激发前30 前30min分别经尾根部皮下注射OVA 外，其余步骤完全同A组；DS组在每次激发前30min，腹 腔注射地塞米松和尾根部皮下注射OVA，剂量同D组和S 组；NS组仅将OVA替换为等量生理盐水同步注射。采用 动物肺功能仪检测各组大鼠气道呼气阻力；留取支气管肺泡 灌洗液(BALF)进行细胞计数和分类；采用双抗体夹心酶 中文摘要 道病理改变；免疫组化法测定肺组织T-bet和GATA．3表达； 用流式细胞仪方法检测CD4+CD2SFoxp3+T细胞比例。 结果： 1 A 105、(2．67±0．98)×105 细胞分别为(41．67±4．14)X 组分别为(124．83±6．45)X 105， 105， 105， 干预组和哮喘组明显高于对照组(尸0．05)。D组和DS组 之间无统计学差异。 2 肺功能及激发试验情况：同等剂量氯化乙酰胆碱 呼气阻力(单位cm 于对照组(PO．05)，经静脉注射乙酰胆碱后A组和干预组 大鼠气道呼气阻力变化幅度高于对照组(PO．05)，显示 造模成功。 2 中文摘要 3 肺组织形态学改变：肺组织中嗜酸粒细胞、淋巴细胞计 数、支气管管壁面积／支气管管腔内周长(WA／Pi)和支气管 平滑肌面积／支气管管腔内周长(ASM／Pi)，哮喘组明显高 述4项指标均减少(尸0．05)。 4 组的表达显著高于NS组，其差异有统计学意义(尸0．05)； 统计学意义(P0．05)，D组和S组比较无统计学意义。 5 比较无统计学意义。 6 D组、S组和DS组两两比较无统计学意义。 7 中文摘要 统计学意义。 结论： 1 免疫耐受的破坏是哮喘发病机制之一。其中T淋巴细 胞分化失衡及调节性T细胞功能缺失是诱导哮喘发病的重 要因素。 2 地塞米松使哮喘大鼠IFN．T表达下调，对Th2型细胞因 子IL．4更加强烈的抑制，同时显著提高血中 示地塞米松诱导哮喘大鼠免疫耐受形成的机制可能与促进 调节性T细胞增加有关。 3 OVA特异性免疫治疗使合成Th2型细胞因子IL．4减 少、Thl型细胞因子IFN．Y增多，同时上调血中 示OVA特异性免疫治疗可诱导原始T细胞向调节性T细胞 转化。 4 肺组织中转录因子T-bet／GATA．3失衡表达与气道炎症 病理改变密切相关，进一步证实免疫失衡与哮喘发病关