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TrkA基因修饰神经千细胞移植治疗阿尔茨海戢病的实验研究 博士掌位论文 Trick基因修饰神经干细胞移植治疗阿尔茨海默病的 实验研究 专 业：神经病学 博士研究生： 贺峰 导 师：邢诒刚教授 中山大学附属第二医院神经科。广州，510120 摘 要 disease 阿尔茨海默病(Alzheimer’sAD)是中枢神经系统一种常见的进行性 13-pcptidcAB) 变性性疾病，其主要的病理学改变包括：以B一淀粉样蛋白(amyloid 为主要成分的神经炎斑(neuriticNP或老年斑senileSP)，神经原 plaques plaques NFTs)，胆碱能递质系统功能损害，及新皮质、 纤维缠结(neurofibrillarytangles 海马等脑区出现广泛的神经元丢失和突触改变。迄今为止，AD确切的发病机制 仍不十分清楚，因此目前在临床上治疗AD的药物主要为“治标”，包括胆碱酯酶 抑制剂、非甾体类抗炎药、雌激素、抗氧化剂、钙通道阻断剂、神经生长因子、 脑循环改善药物、能量代谢促进剂、M1胆碱能受体激动剂、乙酰胆碱释放促进 剂等，对早期、病情较轻的AD患者有一定的疗效。对于中晚期AD患者，由于大 脑皮层及海马等区域神经元大量丢失，胆碱能系统功能严重不足，导致传统AD 药物的治疗效果欠佳，患者症状不能得到有效缓解。 Stem Cell，NSC)的研究进展迅速，为AD 近年来，对于神经干细胞(Neural 的治疗提供了一个崭新的思路。自我更新能力和多向分化潜能是神经干细胞的两 个最基本特征，因此应用神经干细胞分化为多种神经细胞，用于补充AD脑内丢 失的神经元，进而改善中晚期AD患者症状成为可能。神经干细胞还可以作为细 胞载体，较易用经典途径导入耳的基因，而且在植入体内后能根据所处的环境分 化成相应的细胞，有望同宿主神经元形成有效的突触连接，用于神经系统疾病的 基因治疗。目前，神经干细胞的定向分化仍是一个重大课题。国内外许多学者通 TrkA旌囡修饰神经}纲胞移植治盱阿尔获海默病的安验研究 博士掌位论文 过分子生物学技术，将多种外源性基因转染神经于细胞，使神经干细胞表达外源 性基因，从而诱导自身向胆碱能神经元等目的细胞方向转化，并在AD动物模型 上观察到一定的治疗效果。 kinaseA．TrkA)是NGF(nerve 酪氨酸蛋白激酶A(tyrosine protein growth factor)的功能性受体，由基底前脑胆碱能神经元合成，并在其轴突末梢表达， 介导海马、新皮质产生的NGF发挥其对基底前脑胆碱能神经元的营养和促分化 作用。近年来有研究显示，在神经发育过程中，TrkA与胆碱能神经无的标志蛋 式，且TrkA表达早于ChAT；而且在AD的进展中，TrkA表达减少要早于基底 前脑胆碱能神经元的丢失，进而提示TrkA可能参与胆碱能神经元早期分化、发 育、成熟及存活的调节。因此，我们拟利用分子生物学技术，实现TrkA基因的 过表达，观察并模拟TrkA过表达影响神经干细胞分化的过程，使之更接近于神 经发育中的生理状态，并以期利用这一生物学效应治疗AD，在一定程度上减轻 AD早期的病理表现，改善患者认知功能。因此，构建携带TrkA基因的真核表 达载体，转染神经干细胞后进行脑内移植，可能成为治疗AD的有效途径。 干细胞，探讨TrkA基因过度表达与体外诱导神经干细胞向胆碱能神经元定向分 化的关系，并观察TrkA转基因神经干细胞移植对AD模型鼠的治疗作用。 本课