增龄与雌激素缺骨量丢失的分子机制研究.pdf

增豁与雌激素缺乏黄量丢失的分子枧戢研究 增龄与雌激素缺乏骨量丢失的分子机制研究 中文摘要 目的：观察增龄与摘卵后的骨丢失过程中及外源性甲状旁腺激素 (Parathyroidhormone，PTH)干预后的大鼠骨髓细胞过氧化物酶体增殖物激活 Y，PPAR 受体Y(peroxisomeproliferator—activatedreceptor Y)表达变 Y表 达的影响，以探讨原发性骨质疏松症的发生与外源性PTH治疗骨质疏松的可能细 胞分子机制。方法；①取l，3，7，12，16，18，20月龄健康sD大鼠，模拟年龄相 关的骨质疏松大鼠模型，用RT—PCR方法检测实验大鼠骨髓细胞PPARY和核结合 1(core factor a 因二于Q binding alpha1，Cbf1)mRNA表达的增龄变化，并 分析二者变化的相关性；②取6月龄雌性大鼠手术摘除双侧卵巢(OVX)建立模 u 拟绝经后骨质疏松大鼠模型，12周后皮下注射给予20 rhPTH“_㈨治疗8 g／Kg／d q1 周，观察PPARy和CbfmRNA的表达变化，并与手术不摘卵(Sham)及摘卵 不治疗组比较：⑨体外培养骨髓间充质干细胞，给予PTH和E。作用细胞，采用 q RT—PCR和WesternBlot方法检测作用不同时间PPARY和Cbf1的mRNA及蛋白 Y mRNA的表 表达水平的变化，并与不加药组比较。 结果：①增龄过程中PPAR 达在3月龄前变化不明显，7月龄时下降，约为3月龄的34％(PO．01)，之后 1 逐渐上调，18月龄约为7月龄的8．8倍左右(PO．001)；CbfQmRNA表达以3 月龄最高，为1月龄的3倍(PO．001)，随后逐渐下调，18月龄仅为3月龄的6 PO．01)。相关系数随月龄增加而增加，16—20月龄期间二者变化的相关性最大 立。摘卵20周时，与Sham组比较OVX组大鼠的骨量、骨生物力学性能均明显下 间隙增大，同时骨髓腔内脂肪空泡数量显著增加(PO．001)，脂肪空泡面积占骨 大鼠骨量、骨生物力学性能均较不治疗OVX对照组明显增高(PO．Ol一0．001)， 腰椎骨小梁增粗，面积显著增加(PO．001)，间隙变窄，同时骨髓腔内脂肪空泡 数量比OVX组明显减少(PO．001)，脂肪空泡面积占骨髓腔面积的百分比明显低 于OVX组(P0．001)。大鼠骨髓细胞PPARY mRNA表达水平在摘卵后12、13和 Y 周后PPAR Q1 mRNA表达水平均较OVX对照组显著增加 治疗组大鼠骨髓细胞的Cbf y mRNA的表达 (PO．01)。③PTH作用于体外培养骨髓间充质干细胞后，PPAR 增龄s雌激素缺乏骨量丢失的分子机翩研究 水平在72h组比对照组明显降低(PO．05)，同时PTH作用72h后PPARY的蛋白 al 表达水平较对照组降低；Cbf Y E2作用72h后PPARy的蛋白表达水平较对照组明显降低；CbfⅡl