雅安周公山苏云金芽胞杆菌基因资源的研究和杀虫基因的克隆.pfg.pdf

摘要 本研究从四川雅安周公山原始森林土壤中采集土壤350份，应用醋酸钠一抗生素法 筛选出132株苏云金芽胞杆菌菌株，出菌率为11％。初步研究发现这些苏云金芽胞杆菌 的伴孢晶体类型有菱形、方形、球形、无定形等，充分体现了我国菌株资源的多样性。 因此我们对雅安周公山苏云金芽胞杆菌基因资源进行了初步的研究和部分杀虫基因 的克隆，主要结果如下： l、通过对采集的350份土壤的海拔、资源、气候等地理特征分析，总结出了Bt 资源的分布规律：在海拔1742米下，不同海拔高度的Bt出菌率经差异显著性分析后显 示其无明显差异；腐质土比黏土高、黏土又高于沙土；植被覆盖率高的地区，生态条 件优越，Bt分离率高；土壤表面腐质层越厚，土壤所含腐殖质越丰富，Bt含量越多； 山脉阳坡出菌率比阴坡高。 鞘翅目和双翅El的杀虫蛋白带最丰富，显示了周公山Bt菌的杀虫蛋白具有一定的特异 性。 基因含量最丰富，cry2基因其次，cryB和c叫。瑾因第三。 4、克隆了cryBEa4基因(Accession 委员会正式命名为cry9Ea4。 出菌率为19％；另外有4株菌含新Vip3基因。 6、克隆了vip3A基：翮勺部分序列。 VaF 种(Bacillusthingiensis vaten 虫变种(Bacillusthringionsistomocidus)。 翅目的甜菜夜蛾、棉玲虫初孵幼虫有毒力，LC∞分别为23．42ng／mL和13．24ng／mL，而 关键词：苏云金芽胞杆菌cry基因vYp3基因基因克隆抗虫生物活性测定 Abstraet were Sodium Inthis tomlof132Bacillus isolatesscreened study．A thuringiensis by fromthe forestin acetate--anti—-bioticmethodfrom320soil collected primeval samples MounR ofSichuan their isolatedratewas11％． average ZhongGong province，and thatseveral of suchas showed parasporalcrystal bipyramidal， Preliminarystudy shapes wereobserved observationin the quadratendsphericalshape bymicroscopic isolates．Itshowedthe ofBtstrainsin B．thuringiensis greatdiversity Mt．ZhongGong． had studiedonthe resourcesofBacillus Therefore，we thuringiensis preliminarily gene from hadcloned insecticidal