四)液相色谱仪的维护与常见故障.ppt

液相色谱仪的维护与常见故障排除 一 液相色谱仪的 日常维护 储液器 使用HPLC试剂/溶剂，含缓冲盐的流动相过0.45μm膜除去微粒物质;更换流动相时,应彻底清洗，防止交叉污染。 定期清洁储液器及附件，防止长微生物。 输液泵 密封垫易损坏引起故障，每天实验结束一定要认真冲洗泵,注意防止堵塞,使用缓冲盐流动相时,更要小心。 使用HPLC级试剂,注意泵压力不要太高,要适当调整压力,一般压力上限在10-20MPa，下限为0.5MPa，注意防止因泵堵塞造成压力过高损坏柱塞杆或烧坏电机 。 进样器 停机前一定冲洗干净进样器内残留的样品或缓冲盐，防止样品和无机盐沉积造成进样阀转子面磨损或堵塞。 注射器最好使用仪器自配尖头、平头针，不要用其它仪器的。 柱—防止柱性能下降 1 溶剂的化学腐蚀性不能太强； 2 避免颗粒物在柱头沉降； 3 柱压不能太高，防止冲击太大； 4 流动相pH值小于7时，最好用大粒度同种填料的予 柱； 5 柱头加滤片（烧结不锈钢), 需要时加保护柱； 6 经常清洗柱； 7 长时间不用时要保存好,一定要洗去缓冲盐,加入大 于70%有机溶剂，将柱两端拧紧,保持柱填料湿润。 检测器 保持清洁，每天用后与色谱柱一起清洗； 不定期用强溶剂反向冲洗检测器； 使用脱过气的流动相，防止气泡滞留池内； 检测器灯有一定寿命，不用时不开灯。 记录器数据处理系统 记录仪: 热敏式打印头要注意记录纸的质量,开机前注意检查走纸部件,不要卡纸. 色谱工作站: 防止网上病毒损坏软件. 二 常见故障的排除 1、储液器 脱气不充分(噪声大，出毛刺) 用He脱气, 真空脱气, 超声脱气, 加热回馏脱气,(混合流动相不宜) 1、储液器 流动相供给不畅，泵压力不稳 流动相接近用完 过滤器堵塞（有颗粒，长霉） 流速过高,阻力大,造成空化现象.解决的办法是:降低流速;换大孔过滤器;加大管路内径;抬高储液器. 1、储液器 储液器或流动相被污染 产生有规则的噪声； 基线上升，梯度洗脱出鬼峰； 原因: 溶剂质量差（含杂质多）； 配流动相的玻璃器皿不合格,微生物影响； 配制流动相的操作不当（过滤、脱 气、搅拌). 2、输液泵 单向阀 a.球和阀座粘在一起，堵死，打不出溶剂，(缓冲盐流动相) 用高质量的溶剂冲洗，不同极性溶剂冲洗,如水、甲醇、异丙醇、二氯甲烷…，更换新单向阀。 2、输液泵 b. 球和阀座密封不严，压力不稳，气泡进入阀中，紧贴在阀体内，使球难以返回阀座，引起倒流，压力和流速变化大，可能有小晶体颗粒。 清除气泡的办法：打开排液阀，大流量冲洗，用脱过气的甲醇冲洗，一般可解决问题。 2、输液泵 泵垫圈磨损或破碎：高压下压力不稳，从泵头往外渗漏流动相，色谱峰的保留时间会改变。 解决办法：更换新垫圈。更换方法按维修说明书上的方法一步步操作。 2、输液泵 注意： 输液泵的垫圈要和流动相匹配协调。多数垫圈和流动相是协调的,但有的垫圈适用于甲醇、水、乙腈，在四氢呋喃中溶解、变粘、变软。 需换垫圈时,应向厂商咨询垫圈的规格型号。 色谱工作者一般应学会换密封垫圈。 2、输液泵 柱塞杆故障 磨损、漏液 使用不当被折断 柱塞杆被卡住，不能运动。 更换新柱塞杆 请维修工程师帮助解决，或参照专门的操作手册自己动手更换。 3、进样系统 a. 渗漏 转子密封垫圈松紧不合适； 垫圈不配套； 组装不对。 3、进样系统 b. 堵塞, 样品打不进去。 样品管堵塞：环管用反冲法或超 声清洗排除（或换新管). 3、进样系统 c. 注样孔 a) 装样时针头周围渗漏：孔道堵塞，或者放空管和样品管太细，阻力太大；针头密封管规格不对，针头太细。 3、进样系统 c. 注样孔： b)注射孔渗漏：放空管有虹吸现象，转子密封面上孔之间有磨损。为防止虹吸,放空管末端应在放空 瓶液面以上,更换磨损的转子. 3、进样系统 c)样品滞留 阀在进样位置停留时间不够。 要求停留时间至少应让流动相流过的体积是环体积的10-20倍。 (一般是在下一针进样前才将阀扳到装样位置) 3、进样系统 c)样品滞留 残留样品留在样品环中或注射器中，或从放空管中虹吸回来,污染下一个样品.此时可用5-10倍的流动相或新样品冲洗注射孔和注射器,若是虹吸,应加限制管。 3、进样系统 c)样品滞留