tlr-2、4as患者pbmc中的表达及阿托伐他汀对其表达的干预研究.pdfVIP

TLR-2、4：在AS患者PBMC中的表达及阿托伐他汀 对其表达的干预研究 学科专业：内科学风湿专业 硕士研究生：毋静 导师：古洁若教授 摘 要 背景强直性脊柱炎(AnkylosingSpondylitis，AS)是一种慢性的炎症性疾病， 其病因目前尚未完全清楚，研究证明可能与遗传及感染有关。越来越多的研究发现 Like 天然免疫在As的发病和病情进展中起到了一定的作用。TollReceptors(TLRs) 是一组介导天然免疫的受体分子，其中TLR一2、TLR一4不仅介导广泛的病原分子模式 的识别，还能介导对热休克蛋白、透明质酸片断、纤粘连蛋白等多种内源性抗原的 识别，是连接天然免疫和获得性免疫的关键分子。As是～种发病率(我国为0．3％左 右)和致残率高的常见病，但是As的治疗至今缺乏有效的理想改善病情抗风湿药物 (disease antirheumatic modifying drugs，DMARDs)他汀类药物由于其在抗高 血脂领域内的有效性，而得到广泛使用。近年的研究还发现，他汀类药物在抗高血 脂之外具有抗免疫效用。 平表达，研究其变化在AS发病机制和病情进展的作用。探讨HMA—coA还原酶抑制剂阿 托伐他汀对AS患者TLR一2、TLR一4表达的影响，为他汀类药物是否能作为治疗As的药 物提供理论依据。 方法 第一部分： 1．研究对象包括AS活动期患者30例和健康志愿者30例。患者组包括27例男 性，3例女性，平均年龄30．1岁；对照组包括24{≯1J男性，6例女性，平均年 龄22．4岁。 2．所有入组患者做一(BASDAI)及一一(BASFI)评估。 3．所有入组AS患者做ESR及CRP的血清学检测。 4．抽取被研究者外周静脉血分离外周血单个核细胞。 5．提取细胞mRNA。采用RT—PCR方法技术，观察As患者利正常对照外周血单个 核细胞中TLR一2、TLR-4的mRNA表达率。 6．提取外周血单个核细胞总蛋白。采用WesternBlot技术，观察As活动期患 者和正常对照外周血单个核细胞中TLR一2、TLR-4的蛋白表达率。 7．AS组与健康志愿者对照组均数差异性检验采用T检验：TLRs与患者BASDAI 及BASFI的相关性分析采用相关分析。 第二部分： 1．纳入As活动期患者12例。 2．入组被研究者作BASDAI及BASFI评估。 3．入组AS患者做ESR及CRP的血清学检测。 4．抽取被研究者外周静脉血分离外周血单个核细胞。 5．每例患者外周血单个核细胞分为阿托伐他汀干预组(0．01mMol／L)和不干 预对照组：体外培养外周血单个核细胞24sJ、时。 6．收获细胞提取mRNA。采用RT—PCR方法技术，观察阿托伐他汀干预组和不干 预对照组细胞中TLR一2、TLR一4的mRNA表达率。 7．阿托伐他汀干预组和空白对照组均数差异性检验采用配伍组设计的t检 验。 结果 第一部分： 与CRP结果具有相关性(r=O．398，PO．05)。 Ⅱ BASFI 2．同时患者BASFI评分与ESR结果也具有相关性(r=O．507，PO．05)， 评分与CRP结果也具有相关性(r=O．54，PO．05)。 0．039)高，pO．05。 4．AS患者TLR一4 0．039)高，pO．05。 ±2．1)高。 第二部分： l_阿托伐他汀干预组TLR一2的mRNA表达率低于不干预对照组(pO．05)。 2．阿托伐他汀干预组TLR一4的mRNA表达率低于不干预对照组(pO．05)。 结论 可能参与了As的发病。 和TLR一4的表达异常与As的病情活动和进展相关，值