硫酸镁对大鼠血性痴呆保护作用的研究.pdf

郑州大学2006年研究生论文 硫酸镁对太鼠血管性痴呆的保护作用 硫酸镁对大鼠血管性痴呆保护作用的研究 研究生 焦淑洁 导师 王建平 郑州大学第二附属医院神经内科 河南 郑州 450014 摘 要 背景与目的 血管性痴呆(vaSculardeInenda，vD)是因脑血管疾病所致的智能及认知障 碍的临床综合征，主要与缺血性脑血管病有关。随羞世界人口老龄化，血管性痴 呆的发病率逐年升高，已成为威胁人类，尤其是老龄人群健康的重要临床难题。 如何采取措施减少神经元死亡，保护神经组织，减轻脑缺血后智能障碍，已成为 当今研究的热点之一。 大量研究证明，痴呆患者的M孑+代谢存在一定异常，作为神经保护剂之一 的硫酸镁(ma印esium sulfate，MgS04)可通过各种途径阻滞或减轻神经元损伤， 对痴呆具有预防和治疗作用。但是，对治疗用镁剂的浓度和确切的作用机制等还 有待进一步求证。动物实验证实：脑损伤的神经细胞死亡形式与缺血缺氧的严重 程度和持续时间有关。脑缺血引起的急性期神经元的死亡是以坏死为主，而继发 性死亡或迟发性死亡则以凋亡为主。神经元型一氧化氮合酶(n叫_0nalni仃jcoxide synthase，11NOs)在脑缺血时可催化产生一氧化氮(ni倒coxide，No)，这种NO 对神经细胞有毒性作用。已有人提出Mf+可能通过调控细胞凋亡和nNos活性， 上调突触素表达，从而促进突触重塑，发挥其脑保护作用。 本实验通过“两血管阻断+硝普钠降压”法，即大鼠双侧颈总动脉反复夹闭 并再通，同时腹腔注射硝普钠降低血压的方法建立vD大鼠模型，经鼠股静脉推 注M鲻04，用MG．2Y型迷宫比较大鼠学习记忆能力，光镜下观察细胞坏死情况 变化，通过免疫组化方法观察大鼠脑海马突触素、rlNos阳性细胞表达，TuNEL 法检测凋亡细胞，深入探讨Mgs04对vD的疗效和作用机制及是否存在剂量依 赖性，为临床应用Mgs04治疗VD提供依据。 郑州大学2006年研究生论文 硫酸镁对大鼠血管性痴呆的保护作用 材料与方法 (1)健康成年雄性sD大鼠30只，体重300～3509，随机分为模型对照组(A)、 组(D)和假手术组(E)，每组6只。造模成功10天后，B、C、D组分别由股 静脉注入500叫g，I【g、30蚴昏lO嘶矾烈gs04(均为不影响血压的安全剂量， 用生理盐水稀释至5m1)，共15天，同时A组、E组给予生理盐水5ml股静脉推 注。 (2)各组大鼠分别于造模后10天、Mgs04治疗后进行学习记忆能力测试。 测试方法采用MG一2Y型迷宫箱，训练大鼠按信号灯跑向安全通道。每次测试均 于上午8：oo～11：00进行。 (3)各组大鼠在治疗结束后第二天取脑。采用苏木素一伊红(HE)染色观察 光镜下大鼠脑海马神经元变化，免疫组化SP法观察大鼠脑海马nNoS和突触素 阳性表达，nmEL法观察大鼠脑海马凋亡细胞数。 (4)应用sPSSl0．O统计软件进行数据处理，两组均数问比较采用f检验，多 组均数问比较采用单因素方差分析。以口=O．05作为检验水准，实验数据用均数 士标准差(f±J)表示。 结果 (1)VD模型制成后，除E组外，其他各组大鼠均出现不同程度的精神萎靡、 不思饮食、自洁能力下降、反应迟钝、行动迟缓。治疗后B、c、D组均比A组 症状改善明显； (2)治疗前模型组大鼠学习训练中错误次81．50±6．63，假手术组48．67± 各组之间差异均有显著性(均Po．05)； (3)各组病理切片苏木素伊红(HE)染色观察：低倍镜下，B、c、D、E组 大鼠海马细胞结构紧密，层次清晰。A组海马脑组织细胞排列稀疏，细胞线变得 n 郑州大学2006年研究生论文 硫酸镁对大鼠血管性痴呆的保护作用 模糊。高倍镜下，B、c、D、E组细胞核大，染色浅，细胞质丰富，细胞排列紧 密。A组形态正常的细胞数明显减